氨基酸分析仪概况.ppt

全自动氨基酸分析仪概况 一、氨基酸的定义 什么是氨基酸，为什么分析氨基酸？ 地球上近150万种动物、30万种植物和20万种微生物虽然生物种类如此繁多，其外部形态、内部结构、生活习性、繁衍方式千差万别，但本质只有一个，即如恩格斯所说的: “生命是蛋白体的存在方式，这种存在方式的实质就是这些蛋白体化学成分的不断自我更新”。 “蛋白体的化学成分”就是组成蛋白的基本单元－氨基酸，而“不断自我更新”就是氨基酸的不断的重新排列、组合。 一、氨基酸的定义 要探讨和揭示生命现象的发生、发展、死亡、新陈代谢、遗传变异等过程，即与生命相关的生理生化、医疗卫生、农业、畜牧业等就离不开对氨基酸的分析与研究。 随着科学的发展和社会的进步，许多相关的领域，如医药、食品、资源的开发利用、地质勘探，乃至考古、宇宙探秘等也需要氨基酸分析。 今天氨基酸已深入人们的生产与生活，氨基酸分析已成为产品开发、质量控制和生产管理的重要手段。 氨基酸的结构式：R—CH—COOH NH2 二、氨基酸分析的原理 1958年 stein及moore两人先后独立发明离子交换分离、茚三酮柱后衍生氨基酸自动分析仪，1972年同获诺贝尔奖。 柱上保留的氨基酸，因淋洗液的PH值、离子强度、柱温以及氨基酸本身的性质不同而使各种氨基酸得以分离，仪器通过精确控制各种分离及衍生条件以保证定性定量重复性 二、氨基酸分析的原理 二、氨基酸分析的原理 茚三酮与氨基酸的衍生反应 三、为什么要采用茚三酮柱后衍生法 符合国标及国际仲裁标准 仪器自动化水平高 衍生时间、衍生温度等无样品间差异，稳定性、分辨率、分离度具佳 色谱柱寿命长 单样成本低 我国氨基酸检测的相关标准 GB 7649-87 谷物籽粒氨基酸前处理方法 GB/T 15399-94 饲料含硫氨基酸测定方法 GB/T 15398-94 饲料有效赖氨酸测定方法 GB/T 15400-94 饲料色氨酸测定方法 GB/T 14965-94 食品中氨基酸测定 GB/T 5009.124-2003 食品中氨基酸测定 GB/T 18246-2000 饲料中氨基酸的测定 GB/T 14924.10-2001 实验动物配合饲料氨基酸测定 GB/T 8314-87 茶游离氨基酸测定 GB/T 12292-1990 水果蔬菜汁游离氨基酸测定 GB/T 17419-1998 含氨基酸叶面肥 NY/T 793-2004油料及其制品中氨基酸的测定高效液相色谱法 四、产品结构和组成 四、产品结构和组成 四、产品结构和组成 四、产品结构和组成 四、产品结构和组成 五、实验室条件（水解分析） 六、分析实例－－啤酒酵母 六、分析实例－－猪排 六、分析实例－－正常血清 六、分析实例－－苯丙酮尿症血清 六、分析实例－－苹果汁 七、试剂消耗成本 原装成品试剂 ：溶液全部经过上机验证，可获得最佳分析效果，单样成本约20元人民币左右。 国产成品试剂 ：溶液全部经过上机验证，可获得较好分析效果，单样成本约15元人民币左右。 自配试剂(进口固体试剂)：此方案的分析效果取决于所用试剂纯度及水的好坏，单样成本约8元人民币左右。 自配试剂(国产固体试剂)：此方案的分析效果取决于所用试剂纯度及水的好坏，单样成本约3元人民币左右。 八、生产商分布  上海仪先 上海仪先仪器有限公司 韩 春 分离：阳离子交换柱，利用氨基酸的pKa值的不同，用柠檬酸缓冲液不同的pH的变化使氨基酸被逐一淋洗下来。 酸性氨基酸羟基氨基酸中性氨基酸 芳香族氨基酸碱性氨基酸 茚三酮反应原理 脯氨酸与茚三酮反应：波长440nm检测 茚三酮反应原理 其它氨基酸与茚三酮反应：波长570nm检测 茚三酮 还原茚三酮 + 伯胺型氨基酸 兰紫色化合物 + 仲胺型氨基酸 黄绿色化合物 伯胺型 仲胺型 水合茚三酮 还原茚三酮 兰紫色化合物 黄绿色化合物 低 高 40种以上 简单 长 高 高 柱后(专用仪) 高 低 18－26种 繁琐 短 低 低 柱前(液相) 单样成本 一次性 设备投入 分析的氨基酸种类 前处理过程 柱子寿命 衍生物稳定性 自动化程度 溶液存放单元： 茚三酮、缓冲液、清洗液 低温储存 惰性气体保护 输液单元： 梯度系统、等度系统 脱气系统 反应检测单元： 反应柱