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《分子生物学复习提纲

分子生物学复习提纲 第1章 绪论 分子生物学的概念 分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。 分子生物学的研究内容 ①DNA的复制、表达(转录和翻译) ②基因的表达调控 ③DNA重组技术 ④生物大分子结构与功能(结构分子生物学) ⑥基因、基因组、功能基因组与生物信息学 第2章 染色体与DNA 1.名词解释:核小体、半保留复制、半不连续复制、AP位点、C值、C值矛盾、卫星DNA、转座、转座子、端粒酶、冈崎片段、复制叉、复制子 核小体:是染色质的基本单位,由大约200bp的DNA和组蛋白八聚体及外围H1蛋白所组成。 半保留复制:新合成的双链DNA分子中,一条链来自母链,另一条链则是以母链为模板合成的。 半不连续复制:DNA复制过程中,一条子链的延伸方向与复制叉前进的方向相同,连续合成,另一条子链的延伸方向与复制叉前进的方向相反,需要先合成一些小的不连续的片段,然后再将这些不连续的片段连接起来成为一条连续的链,这样的复制方式称为半不连续复制。 AP位点:所有细胞中都带有不同的类型、能识别受损的核酸位点的糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点。 C值:通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量,以每细胞内的皮克(pg)数表示。 C值矛盾:也称C值谬误,指C值往往与种系的进化复杂性不一致的现象,即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物C值却很大,如一些两栖动物的C值甚至比哺乳动物大。 卫星DNA:又称随体DNA,因为真核细胞的DNA的一部分是不被转录的异染色质成分,其碱基组成与主体DNA,因而可用密度梯度沉降技术如氯化铯梯度离心将它与主体DNA分离。卫星DNA通常是高度串联重复的DNA。 转座:遗传信息从一个基因座转移到另一个基因座的现象称为基因转座,是由可移位因子介导的遗传物质的重排。 转座子:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。参与转座子易位及DNA链整合的酶成为转座酶。 端粒酶:也称为端聚酶或端粒末端转移酶,是真核细胞所特有的,其作用是维持染色体端粒结构的完整性。 冈崎片段:是在DNA的半不连续复制中产生的长度为1000-2000个碱基的短的DNA片段,能被连接成一条完整的DNA链。 复制叉:复制时,双链DNA要解开成两股链分别进行DNA合成,所以,复制起点呈叉子状,被称为复制叉。 复制子:单独复制的一个DNA单元被称为一个复制子,它是一个可移动的单位。一个复制子在任何一个细胞周期只复制一次。 DNA双螺旋结构模型的要点 ①螺旋参数(螺旋直径为2nm等) ②主链(两条主链反向平行,并呈右手螺旋)DNA模板上合成一段RNA链,它提供引发末端(被称为引物) DNA聚合酶(原核DNA pol I和DNA pol III的特点及作用):参见课本48页表2-11 DNA连接酶:负责催化一个双螺旋DNA分子内相邻核苷酸3‘-OH和5‘-磷酸,甚至两个双螺旋DNA分子两端的3‘-OH和5‘-磷酸发生连接反应 解螺旋酶:一类催化DNA双螺旋进行解链的酶 拓扑异构酶:一类通过催化DNA链的断裂、旋转、和再连接而直接改变DNA拓扑学性质的酶 单链DNA结合蛋白(SSB):一种专门与DNA单链区域结合的蛋白质 复制的基本过程 以E.coil为例,分为起始、延伸和终止三个阶段 起始:包括对其复制起始区的识别以及引发体的形成 延伸:包括前导链、后随链的合成 终止:当两个复制叉在终止区(存在6个Ter位点)相遇后,DNA复制即停止 DNA损伤修复的类型及修复机制 ①错配修复:依据来自Dam甲基化酶,它能使5‘-GATC序列中腺苷酸的N6位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点,母链就会在开始DNA合成前的几秒钟至几分钟内被甲基化。此后,只要两条DNA链上碱基对出现错误,错配修复系统就会根据”保存母链,修复子链“的原则,找出错误碱基所在的DNA链,并在对应于母链甲基化腺苷酸上游鸟苷酸的5‘位置切开子链进行修复。 ②切除修复(碱基、核苷酸): 碱基切除修复:DNA糖苷酶沿着双螺旋的小沟扫描DNA,发现受损伤的碱基后即与DNA结合,并诱导DNA结构发生歪曲,以使损伤碱基挤出双螺旋进入它的活性中心进行切割。 核苷酸切除修复:针对损伤对DNA双螺旋结构造成的扭曲 ③重组修复:它发生在复制之后,即先跳过该损伤部位,在新合成链中留下一个对应于损伤序列的缺口,该缺口由DNA重组来修复,即先从同源DNA母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处,然后再用新合成的序列补上母链空缺。 ④DNA直接修复:直接把损伤的碱基回复到原来状态 ⑥SOS修复:DNA受到严重损伤出现单链缺口,ssDNA激活RecA作用于LexA,使其发生自我切割,

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