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分子生物学讲稿分子生物学讲稿
分子生物学讲稿
陈耕夫副教授
绪论
一、分子生物学
分子生物学是从分子水平来研究生命现象的科学。其核心内容是通过生物的物质基础――核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构,功能及其相互作用等运动规律的研究来阐明生命现象的分子基础,从而探索生命的奥秘。分子生物学是现代生命科学的“共同语言”。
二、分子生物学的任务
1. 核酸的分子生物学
是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译,核酸存储的信息修复与突变,基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。
2. 蛋白质的分子生物学
蛋白质的分子生物学研究执行各种生命功能的主要大分子——蛋白质的结构与功能。
3. 细胞信号转导的分子生物学
研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。
三、分子生物学与现代医药科学的关系
在发病机制方面的研究应用、在疾病诊断中的应用、 在疾病治疗中的应用、 在个体识别中的应用、 在医药工业领域的应用,等等。
第一章 核酸的分子结构、性质和功能
一、核酸是遗传物质
(一)核酸的种类和分布
分布:
DNA:主要分布在细胞核(或类核区)、线粒体、叶绿体
RNA主要分布在细胞质中
(二)核酸是遗传物质
DNA是遗传物质的证据:肺炎双球菌的转化试验、噬菌体感染实验等。
RNA是遗传物质的证据:烟草花叶病毒M和HR品系的重建试验
二、DNA的结构与功能
(一)DNA的一级结构与种属的差异
DNA一级结构指的是脱氧核苷酸在DNA链中的组成和排列顺序。DNA一级结构的不同是物种间差异的更本原因。除了少数RNA病毒外,DNA几乎是所有生物遗传信息的携带者。
核酸一级结构的书写方式。
(二)DNA的二级结构具有多样性
1. 双螺旋结构是DNA二级结构的主要类型
DNA双螺旋结构主要有A、B、Z等三种类型,染色体在大多数时候以B型DNA形式存在。
B型DNA二级结构特点:
两条脱氧核酸链构成右手双螺旋结构,链的走向相反;磷酸脱氧核糖链在螺旋的外侧,碱基在螺旋的内侧;脱氧核糖平面与碱基平面相互垂直;碱基配对规律:A=T、G?C;稳定力横向是氢键;纵向是碱基堆积力。
2. 三链DNA(Triplex DNA)结构
当DNA发生重组时,单链DNA侵入DNA双螺旋局部区域可以形成三链DNA结构。
DNA双螺旋中,多聚“嘌呤核苷酸-嘧啶核苷酸”是形成三链结构的结构基础。第三条单链为多聚“嘧啶核苷酸-嘌呤核苷酸”序列,则与双链DNA的碱基形成Hoogsteen配对。
3. 四链DNA(Quadruplex DNA)结构
真核生物DNA3’-末端是富含GT的多次重复序列,因而自身形成了折叠的四链DNA结构。
(三)DNA的超螺旋结构(三级结构)
1. DNA超螺旋结构的概念
超螺旋结构(superhelix 或supercoil):DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。超螺旋结构又分为正超螺旋核负超螺旋:
正超螺旋(positive supercoil):盘绕方向与DNA双螺旋方同相同。
负超螺旋(negative supercoil):盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。
2. 原核DNA超螺旋结构
原核DNA也能与相应的核蛋白结合形成超螺旋结构,但其与蛋白质结合没有特点的结构特点。
3. 真核DNA超螺旋结构
真核生物染色体由DNA和蛋白质构成,其基本单位是核小体(nucleosome)。DNA双螺旋有规律地盘绕组蛋白形成核小体,再进一步的多次盘绕,最后形成染色体。
三、RNA的结构与功能
(一)mRNA、tRNA、rRNA
1. mRNA和hnRNA
mRNA的功能是通过三联体密码子指导蛋白质的生物合成。真核mRNA与原核mRNA在结构上有很显著的差别。
真核mRNA结构及功能特点:
(1)转录在细胞核进行,翻译在细胞浆进行;
(2)hnRNA含内含子,需切除内含子连接外显子才成为有活性的mRNA;
(3)一条mRNA只能翻译出一种蛋白质;
(4)5有帽子结构:与真核mRNA抗5核酸外切酶及正确识别翻译起始位置有关;
(5)3有尾巴结构:与mRNA从细胞核转移到细胞浆及mRNA半衰期有关。
2. tRNA
tRNA的主要功能是在蛋白质合成过程中根据密码子的指引,搬运正确的氨基酸至翻译位置,起着翻译“适配器”的作用。
tRNA二级结构特点、三级结构特点。
(1)氨基酰tRNA合成酶是翻译保真性的保证
其翻译保真性主要依赖于:①氨基酰-tRNA合成酶具有酶的高度特异性,通过识别氨基酸与tRNA上的特殊部位(又称为副密码子或鉴别元件)来保证氨基酸与相应tRNA的正确链接;②氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性,即带有相应反密码子的tRNA如果连接上错误的氨基酸,则氨基酰-tRNA合成酶不会把错误链接的氨基酰-tRNA释放到溶液中,而是将
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