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植生实验-生物091课件
植 物 生 理 学 实 验 陈 瑛 一、实验目的 掌握渗透势和水势的测定方法;理解渗透势和水势的概念;并掌握用移液管配制蔗糖溶液的技术。 二、实验主要仪器设备及材料 天平、显微镜、毛细吸管、试管、镊子; 蔗糖、亚甲基蓝、洋葱、波菜。 三、实验原理 ΨW=ΨS+ΨP+ΨM +ΨG ΨS=Ψл= - i c R T 四、实验步骤 1、在干洁的试管中配制下列各种浓度的蔗糖溶液各10ml。 最后浓度(M=mol/L) 1M蔗糖母液(ml) 蒸馏水(ml) 0.05 0.5 9.5 0.10 1.0 9.0 0.20 2.0 8.0 0.30 3.0 7.0 0.40 4.0 6.0 0.50 5.0 5.0 0.60 6.0 4.0 2、在另7支试管中用移液管分别注入对应浓度糖液各2ml,每管用镊子放入用剪刀剪取的青菜叶片100片,要浸没在糖液内。封口,每隔数分钟轻摇。 3、60分钟后向装叶的试管中加入亚甲基蓝粉末少许,摇匀,使成兰色。用干洁毛细滴管吸取有色液少许,轻轻伸入同浓度对应管糖液中部,再轻轻挤出一小滴,小心抽出滴管,另换一支滴管,按同法,取另一管带色糖液进行测试,观察有色小液滴升降情况。 4、用镊子撕下洋葱鳞片外表皮(单层、有色),直接放在滴有不同浓度糖液的载玻片上,使其展开。10分钟后盖上盖玻片,于显微镜下观察细胞质壁分离现象。确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度和不引起质壁分离的最高浓度。找出极限后,用新溶液和叶片重复进行几次,直到确定为止。 五、计算 根据公式Ψл= - i c R T,分别计算植物组织水势和渗透势。 I=1.0 T=273+27℃ R=0.0083 L?MPa/mol?K C=体积摩尔浓度,单位mol/L。 六、思考题 1、为何小液流法测定的是叶片的水势,而质壁分离法测定的是渗透势? 2、小叶流法中为何加入甲烯蓝,加多加少是否对实验结果有影响? 七、实验报告 1、目的 2、原理 3、实验步骤 4、实验结果-有签名 5、计算 6、分析 7、思考题 一、实验目的 掌握用比色法测定植物中总铁量的方法,掌握722分光光度计的使用及标准曲线的制作方法。 二、实验原理 Fe2+ + H+ + MnO4- Fe3+ + Mn2+ + H2O Fe3+ + 3CNS- Fe(CNS)3 三、实验主要仪器设备及材料 722分光光度计、天平、容量瓶; 浓盐酸、硫氰化钾、高锰酸钾。 1、灰分100mg + 6mol/LHCl 1.0ml溶解,用0.1mol/LHCl 2ml转移至离心管,摇匀,4000转离心10分钟,沉淀用0.1mol/L HCl 5ml洗涤,再离心,上清液并入25ml刻度管,蒸馏水定容。 2、 试管 0 1 2 3 4 5 6 7 8 标准铁溶液* 0 0.1 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 0 0 灰分液 0 0 0 0 0 0 0 2.5 2.5 H2O 2.5 2.4 2.1 1.7 1.3 0.9 0.5 0 0 各加 KMnO4 1d,6MHCl 1ml,KCNS 1.5ml,丙酮 5ml, 边加边摇匀,置暗处。 A500nm *:Fe含量为20微克/ ml 3、计算 求标准
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