安岩20082895不同铜源对Caco-2细胞培养基质及细胞中酶活性的影响探究.docVIP

青岛农业大学 毕 业 论 文 题 目：不同铜源对Caco-2细胞培养基质及细胞 中酶活性的影响 姓 名： 安 岩 学 院： 动物科技学院 专 业： 动物医学专业 班 级： 0801 学 号： 指导教师： 朱连勤 教授 2012年06月08日  目录 中文摘要 1 Abstract 1 中英文对照表 1 引言 1 1 材料与方法 4 1.1 材料 4 1.1.1 细胞株 4 1.1.2 主要试剂及耗材 4 1.1.3 主要仪器 4 1.1.4 主要溶液配制 5 1.1.5 培养用品准备 5 1.2 试验方法 6 1.2.1试验设计 6 1.2.2检测方法 6 1.3 数据处理 7 2 结果 7 2.1不同铜源对Caco-2细胞培养基质中的铜离子浓度的影响 7 2.2不同铜源对Caco-2细胞培养基质及细胞中酶活性的影响 7 3 讨论 9 3.1不同铜源对Caco-2细胞培养基质中的铜离子浓度的影响 9 3.2不同铜源对Caco-2细胞培养基质及细胞中酶活性的影响 9 4 结论 10 致谢 11 参考文献 12 不同铜源对Caco-2细胞培养基质及细胞中酶活性的影响 动物医学专业 安 岩 指导教师 朱连勤 摘要：本试验旨在利用Caco-2细胞模型，研究纳米氧化铜对Caco-2细胞中酶类的影响，为进一步探讨纳米氧化铜在肠道中的转运吸收机制奠定理论基础。取对数生长期Caco-2细胞，按2×105个/mL的细胞浓度接种于6孔板中，在37℃、5%CO2浓度及饱和湿度的条件下培养24 h后，换成含有不同铜源的培养液。硫酸铜组（铜浓度分别为4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L、32 mg/L）；微米氧化铜组（铜浓度分别为4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L、32 mg/L）；纳米氧化铜组（铜浓度分别为4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L、32 mg/L），每组设6个重复。作用24 h后，收集培养基质检测铜离子浓度和LDH活性，收集细胞裂解液检测ALP、SOD活性。结果显示，铜水平16 mg/L和32 mg/L纳米氧化铜的溶解度分别显著高于同等铜浓度的微米氧化铜，低于硫酸铜（P0.05）；纳米氧化铜组（16 mg/L、32 mg/L）的LDH活性分别低于同等浓度下的硫酸铜组（P0.05）；在培养基中以硫酸铜形式添加铜32 mg/L，以纳米氧化铜形式添加铜8 mg/L、16 mg/L和32 mg/L，以氧化铜形式添加铜16 mg/L时，Caco-2细胞中ALP活性显著低于对照组(P0.05)；添加纳米氧化铜的各组的SOD活性显著高于对照组和添加微米氧化铜的各组（P0.05）。由此表明，纳米氧化铜在Caco-2细胞培养基质中部分以铜离子形式存在，其对细胞的损伤要小于硫酸铜，同时能提高Caco-2细胞的抗氧化能力。 关键词：Caco-2细胞；纳米氧化铜；乳酸脱氢酶；碱性磷酸酶；超氧化物歧化酶 Copper from Different Sources to the Effect of Enzymes Activity in the Caco-2 Cells Culture Matrix and in the Cells Student majoring in Veterinary Medicine An Yan Tutor Zhu Lian-qin Abstract: This test was designed to take advantage of the Caco-2 cells in vitro experimental model, study nano-CuO to the effect of the enzymes in Caco-2 cells and culture matrix and establish the theoretical basis to further investigate into the intestinal absorption