真核基因表达调控-1.pptVIP

细胞表面受体与配体分子的高亲和力特异性结合，能诱导受体蛋白构象变化，使胞外信号顺利通过质膜进入细胞内，或使受体发生寡聚化而被激活。 受体分子活化细胞功能的途径主要有两条： 一是受体本身或受体结合蛋白具有内源酪氨酸激酶活性，胞内信号通过酪氨酸激酶途径得到传递； 二是配体与细胞表面受体结合，通过G蛋白介异的效应系统产生介质，活化丝氨酸/苏氨酸或酪氨酸激酶，从而传递信号。 细胞表面的三类受体示意图 蛋白质磷酸化和GTP结合蛋白参与的信号转导过程 已发现蛋白激酶基因2000余个和1000个左右蛋白质去磷酸化酶基因。根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基可分为： 丝氨酸/苏氨酸型；酪氨酸型；组氨酸型。 根据是否有调节物参与蛋白激酶活性可分为两大类： 信使依赖型（又分胞内信使、调节因子依赖型和激素或生长因子依赖型） 非信使依赖型。 1. 受cAMP水平调控的A激酶 依赖于cAMP的蛋白激酶称为A激酶（PKA），它能把ATP分子上的末端磷酸基团加到某个特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上。 被A激酶磷酸化的氨基酸N端上游往往存在两个或两个以上碱性氨基酸，特定氨基酸的磷酸化（X-Arg-Arg-X-Ser-X）改变了这一蛋白的酶活性。 在不同的细胞中，A激酶的反应底物不一样，所以，cAMP能在不同靶细胞中诱发不同的反应。 1. 受cAMP水平调控的A激酶 非活性状态的PKA全酶由4个亚基R2C2所组成，分子量约为150-170，调节亚基与cAMP相结合，引起构象变化并释放催化亚基，后者随即成为有催化活性的单体. 1. 受cAMP水平调控的A激酶 糖原代谢时，激素与其受体在肌肉细胞外表面相结合，诱发细胞质cAMP的合成 并活化A激酶，后者再将活化磷酸基团传递给无活性的磷酸化酶激酶，活化糖原磷酸化酶，最终将糖原磷酸化，进入糖酵解.过程并提供ATP。 已经证实，许多转录因子都可以通过cAMP介导的蛋白质磷酸化过程而被激活，因为这类基因的5’端大都拥有一个或数个cAMP应答元件（CRE），基本序列为TGACGTCA。 2. C激酶与PIP2、IP3和DAG 该蛋白激酶活性是依赖于Ca2+的，故称C激酶（PKC）。 IP3引起细胞质Ca2+浓度升高，导致C激酶从胞质转运到靠近原生质膜内侧处，并被DAG和Ca2+的双重影响所激活。DAG提高了C激酶对于Ca2+的亲和力。 C激酶是一个7.7×104的蛋白质，主要实施对丝氨酸、苏氨酸的磷酸化，具有一个催化结构域和一个调节结构域。与DNA结合以后还能解除调节区所造成的抑制作用，提高酶活性。 激酶信号传递及基因表达示意图 3. CaM激酶及MAP激酶 Ca2+的细胞学功能主要通过钙调蛋白激酶（CaM-kinase）来实现的，它们也是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，但仅应答于细胞内Ca2+水平。 MAP激酶（MAP-kinase，ERKS）活性受许多外源细胞生长、分化因子的诱导。MAP-激酶活性取决于该蛋白中仅有一个氨基酸之隔的酪氨酸、丝氨酸残基是否都被磷酸化。 3. CaM激酶及MAP激酶 能同时催化这两个氨基酸残基磷酸化的酶被称为MAP-激酶-激酶，它的反应底物是MAP激酶。 MAP-激酶-激酶本身能被MAP-激酶-激酶-激酶所磷酸化激活，后者能同时被C激酶或酪氨酸激酶家族的Ras蛋白等激活，从而在信息传导中发挥功能。 4. 酪氨酸激酶（PTK）途径 包括跨膜受体家族与胞质非受体家族两大类。 受体类由胞外结合配体结构域、跨膜结构域和细胞质激酶结构域组成，其PTK活性受胞外结构域与配体的调节。配体与受体结合可诱导受体蛋白的二聚化，将受体胞质区酪氨酸残基磷酸化。 非受体酪氨酸激酶除有一段与前者同源的激酶结构域序列外，还有数个前体所不具备的保守区。 因为Src亚家族非受体酪氨酸激酶以及许多PTK作用底物分子都存在被称为Src同源结构域（SH）的序列。所以又将激酶功能区称为SH1，而将另外两个区分别命名为SH2和SH3。 SH2由约100个氨基酸残基组成，能与带有磷酸酪氨酸的蛋白质结合， SH3由约60个氨基酸残基组成，参与将前者定为于质膜内侧或与细胞骨架蛋白相互作用，与SH2结合无关。 在正常细胞中，pp60c-Src上的Tyr527被磷酸化并以头尾相连的缔合方式折入同一分子的SH2结构域中，从而抑制了PTK活性。pp60c-Src与靶分子PI3激酶，rasGAP等的缔合作用均涉及pp60c-SrcSH2结构域与PI3激酶及rasGAP分子上酪氨酸磷酸化区的结合。 5. 蛋白质磷酸化与细胞分裂调控 细胞通过p53及p21蛋白控制CDK（cyclin-dependent protein kinase）活性，调控细胞分裂的进程。 P21蛋白过量时，大量周期蛋白（cyclin）E-CDK2复合物与P21蛋白相结合，使CDK2丧失磷