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紫外可见分光光度计754 对比吸收光谱特征数据 对比吸收度（或吸收系数）的比值 对比吸收光谱的一致性 本课小结 1.鉴别: 2.杂质检查:限量检查 七、含量测定方法 （1）对照品比较法 按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对 照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分规定 量的100%±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长处 测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下式计算供试品 中被测溶液的浓度，再计算含量。 　 A样品/A对照＝c样品/c对照 c样品＝A样品×c对照/A对照 式中：A为吸收度值；c为测试液浓度（以mg/ml计）。 （2）吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定 其吸光度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本 法测定时，吸收系数通常应大于100，并注意仪器的校正和检定。 ［示例］维生素B12的水溶液在361nm处的E值是207，盛于1cm 吸收池中，测得溶液的吸收度为0.414，则溶液浓度是多少？ [检查]:吸收度：取本品加水 制成每1ml中含有1.88mg的 溶液，在280nm的波长处测 定，吸收度不大于0.1，在2 64±1nm处，最大吸收度应 在0.80－0.88之间。 [鉴别]：取本品加氢氧化钠 制成1ml含20μg的溶液，在 287 ± 1nm处有最大吸收， 其吸收度为0.49。 1.青霉素钾 2.甲氧苄氨嘧啶 * 学习目标 复习提问 新课大纲 新课内容 本课小结 课后习题 * 第六章　光谱分析法 理解紫外-可见分光光度法的基本原理；掌 握吸收定律和吸收系数的含义； 掌握紫外-可见分光光度计的基本类型与结 构；掌握紫外-可见分光光度法的主要应用。 能使用紫外分光 光度计测定药物的含量 什么是非水滴定？有什么优点？ 举例说明碘量法测定的具体操作及注意事项？ 本 节 课 内 容 紫外分光光度法概述及基本原理 紫外分光光度计主要部件及分类。 应用示例 朗伯－比尔定律： 式中：A为吸收度；T为 透光率；E为吸收系数； c为溶液浓度；l为光路长 度。 紫外-可见分光光度法 是通过被测物质在紫 外-可见光区的特定波 长或一定波长范围内 光的吸收度，对该物 质进行定性和定量分 析的方法。 使用200～760nm 波长范围的光。 　主要用于药品的鉴 别、检查和含量测定。 概述 基本原理 E 　入射光为单色光 　溶液是稀溶液 　该定律适用于固体、 液体和气体样品 　在同一波长下， 各组分吸光度具有 加和性 应用：多组分测定 1）摩尔吸光系数ε： 在一定λ下，C=1mol/L， L=1cm时的吸光度 2）百分吸光系数 E： 在一定λ下， C=1g/100ml，L=1cm时 的吸光度 3）两者关系 Lamber-Beer定 律的适用条件 吸光系数两 种表示法 单色器 光源 检测器 吸收池 信号显 示系统 紫外-可见分 光光度计基本结构 由光源、单色器、吸收池、检测器、 信号显示系统五个部分构成。 主 要 部件 1.光源:采 用氘灯和钨卤灯 常用标准氘光源：　　钨灯最适宜的 使用波长范围为320～1000nm。 　　　氘灯是最常用的紫外 光光源，它能发出光的波 长范围一般为190～400nm， 使用波长范围一般为 190～360nm，它的发光 强度和灯的使用寿命 比氢灯增加2～3倍。 [光源] 对光源的基本要求是应在 仪器操作所需的光谱区域 内能够发射连续辐射，有 足够的辐射强度和良好的 稳定性，而且辐射能量随 波长的变化应尽可能小。 分光光度计中常用的光源 有热辐射光源和气体放电 光源两类。 热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和 卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区， 如氢灯和氘灯。 在近紫外区测定时常用氢灯和氘灯。它们可在160 ~ 375 nm范围内产生连续光源。氘灯的灯管内充有氢的同位素 氘，它是紫外光区应用最广泛的一种光源，其光谱分布与 氢灯类似，但光强度比相同功率的氢灯要大3~5倍。 　入射狭缝、准直镜、色散元件、聚焦透镜和出射狭缝组成 (色散元件:棱镜和光栅 ) 2.单色器: 　1.入射狭缝 2.准直透镜 3.棱镜 　4.聚焦棱镜 5.出射狭缝 　 3.光栅 光栅分为透射光栅和反射光栅， 常用的是反射光栅。反射光栅又 可分为平面反射光栅（或称闪耀 光栅）和凹面反射光栅。 光栅由玻璃片或金属片制成， 其上准确地刻有大量宽度和距离 都相等的平行线条（刻痕），可 近似