新·分光光度法应用的发展.pptVIP

2.6 分光光度法应用的发展 吸光光度法主要应用于微量组分的测定，也能用于高含量组分的测定，多组分分析以及研究化学平衡、络合物的组成等。现按分光光度法在应用中的发展，简要介绍如下： 2.6.1 高含量组分的测定——差示分光光度法 差示分光光度法（1） 普通的分光光度法采用不含已显色被测组分的参比溶液，而差示分光光度法则使用一定浓度的经显色的被测液作参比溶液。 例如：高吸光度差示法是用浓度比试样溶液稍低的标准溶液在同样条件下显色，用作参比溶液来调节T=100% 。 差示分光光度法（2） 例：若普通的分光光度法测得试样的T=7.0%, 配制一浓度稍低的标准溶液S,测得T=10.0%, 二者之差为3%;用差示法时，以此标准溶液S来调节仪器令T=100%,再来测定试样X,可得T=70.0%, 二者之差为30%。这样，差示法相当于把标尺扩大了10倍，测量读数的相对误差也就缩小了10倍。 差示分光光度法（3） 差示分光光度法的测定步骤： 采用浓度为Cs的标准溶液为参比溶液; 2）测定一系列ΔC已知的标准溶液的相对吸光度(Ar)； 3）绘制Ar-ΔC工作曲线； 4）由测得试样溶液得相对吸光度Ar,x，即可从Ar－ΔC工作曲线上求出ΔC(5)根据Cx＝Cs+ΔC求出试样浓度Cx Vc 2、差示法与普通法的比较的特点 例：(1)假设以空白溶液作参比时，浓度为Cs的标准溶液透光度Ts＝10％，浓度为Cx的试液的透光度Tx＝5％(如图)。 3、差示分光光度法(差示法)与普通法光度法的关系 (1)差示法 差示测定试液浓度(Cx)时，采用浓度稍低于试样的标准溶液(Cs)作参比溶液调节仪器透光度读数为100％(A=0)，再测定试样溶液的吸光度(Ar称为相对吸光度)，相对应的透光度(Tr)称为相对透光度。 （2）普通光度法与差示法的关系 普通光度法以纯溶剂或空白试剂作参比溶液，测得标准溶液及试液的吸光度分别为As和Ax，对应的透光度为Ts和Tx，根据比尔定律 Ax＝εbCx，As＝εbCs Ar＝Ax－As＝εb(Cx-Cs)＝εbΔC 上式意义：在符合比尔定律测定浓度范围内，差示法测得的相对吸光度(Ar)与被测溶液和参比溶液的浓度差(Cx－Cs,即ΔC)或成正比，即可用于定量测定。此时试液的Tr,x＝50％，令读数落在适宜的范围内，提高了测定的准确度。 4、参比溶液浓度与测量误差的关系 参比溶液浓度与测量误差的关系可用图2-15表示： 图中A＝0.0为普通法的误差曲线,设仪器透光度读数的绝对误差ΔTr＝0.05％， 由图可见： 随着参比溶液浓度的增加，即Ts减少，浓度相对误差也减小 ,结果差示法测定的准确度可与重量法或滴定法接近。 由图可知： 1、 高吸光度的参比溶液能降低测量误差，但是浓度越高，透过光线越弱，产生的光电流就越小，以至调节仪器的满标有困难。 为此，要求仪器必须增强入射光的强度，或能增加光电流的放大倍数，以便在使用高吸光度参比溶液时，仍能调节仪器的满标度（T＝100％）。 由图可知： 2、差示法对仪器的灵敏度和稳定性提出了较高的要求。 差示分光光度法校正曲线的线形关系往往受到破坏，测定范围小，这是实际工作中必须注意的。 2.6.2 多组分混合物的分析——计算数学分光光度法 分光光度法可以不经分离而测定试液中两种以上组分。 如果两种组分的吸收曲线彼此不相干扰，可方便地选择适当地波长进行测定，如果两种组分地吸收曲线相互干扰时，则可用解联立方程式的方法，求出各组分的含量。 例： 钢铁中Mn和Cr的测定:试样经过处理后，得到MnO4－和Cr2O72－。首先用KMnO4和KMnO标准溶液制作吸收曲线，如右图。 从图得知它们在可见光区的吸收峰分别是540nm和440nm （KCr2O7标准溶液分别在吸收峰，但当波长小于425nm时，Fe3+会有强烈吸收，故不采用350nm吸收峰，而用440nm波长时的小吸收峰）。 例：续（一） 用KMnO4和KCr2O7标准溶液分别在波长540nm（λ1）和440nm（λ2）测定吸收光度，并根据ε＝A/bc计算KMnO4在λ1及λ2的摩尔吸光系数ε(λ1)、ε（λ2）和KCr2O7在λ1及λ2的摩尔吸光系数ε2(λ1)、ε2(λ2).再分别在波长λ1及λ2测定试液的总吸光度Aλ1和Aλ2。 例：续（二） 设试液中MnO4－和Cr2O72－浓度分别为c1及c2。根据吸光度加和原理，设b＝1cm，则有： 例：续（二） 2.6.3 分光光度滴定法 利用分光光度计测量滴定过