灭菌与灭菌技术选编.ppt

第一节 概述 需要灭菌的制剂：直接注入机体或与粘膜、创面接触的药剂 无菌（Sterility）：是指物体或任一给定的介质中，没有任何活的微生物存在或无论用任何方法都鉴定不出活的微生物来 灭菌（Sterilization）：应用物理或化学等方法把物体上或介质中所有的微生物及其芽胞全部杀死，即获得无菌状态的总过程 消毒（Disinfection）：用物理或化学等方法杀灭物体上或介质中的病原微生物（除了芽胞） 防腐（Antisepsis）：用物理或化学等方法抑制微生物生长的作用，称为防腐或抑菌 热原（Pyrogens）：热原是微生物的一种内毒素，存在于细菌的细胞膜与固体膜之间，能够引起人或动物体温的异常升高。致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原 无菌操作法（Aseptic technique）：是指在整个操作过程中利用和控制一定条件，尽量使产品避免微生物污染的一种操作方法 细菌的耐受性 致死温度：是指在一定的时间内，杀死某种细菌所需要的最低温度 致死时间：是指在某一温度下，杀死某种细菌所需要的最短时间，又称热死时间 灭菌和除菌对制剂的影响 灭菌后的制剂中含有细菌的尸体，尸体过多会因菌体内毒素（热原）而引起副作用 除菌是指用特殊的滤材把微生物（死菌、活菌）全部阻留而滤除，除了原已染有的微量可溶性代谢产物，由于没有菌体的存在，故没有更多的热原产生 不同菌种的耐热性 芽胞抗高温的原因 芽胞壁厚而致密，热力不易透入芽胞内 芽胞内水分含量少，加热时蛋白质不易凝固，酶不易失去活性 芽胞内含有吡啶2，6-二羧酸钙，它与蛋白质结合成耐热的复合体 第二节 微生物死亡动力学的研究 实质 是寻找对灭菌效果可靠的验证参数 原因 灭菌温度多是测量灭菌器内的温度而不是灭菌物体内的温度 现行方法不易检出残存的微生物 一、D值 D值是指降低微生物数至原来的10％或降低一个对数单位所需的时间或剂量，也就是杀灭90％微生物所需的时间或剂量 D=U/（lgN0-lgNu） U为在一定灭菌条件下灭菌经历的时间或接受的剂量；N0为微生物的初始数量；Nu为接受了U单位时间或剂量的灭菌后微生物的数量；Nt为t时间微生物的残留数量 二、Z值 不同温度下对特定的微生物在特定介质或环境中求得D值后，就可用lgD对温度作图 Z=（T2-T1）/（lgD1-lgD2） 表示降低一个lgD值所需升高的温度，及灭菌时间减少到原来的10％所需升高的温度 三、F值与F0值 F=△t∑10 T-T0/Z △t是测量被灭菌物温度的时间间隔，一般为0.5～1.0分钟或更小；T是每个时间间隔△t所测得的被灭菌物料的温度，T0是参比温度 F值是指在一定温度T下给定Z值所产生的灭菌效力与在参比温度T0下给定Z值所产生的灭菌效力相同时，T0温度下所相当的灭菌时间 F值适用于干热灭菌 F0值-物理F0值 在湿热灭菌条件下测定的，且以嗜热脂肪芽胞杆菌作为微生物指示菌，该菌在121℃下，Z值为10℃ F0=△t∑10 T-121/10 F0为一定灭菌温度T，Z值为10℃时所产生的灭菌效力与121℃，Z值为10℃所产生的灭菌效力相同时所相当的时间 F0值将各种灭菌温度使微生物的致死力转换为灭菌物品完全暴露于121℃对微生物的致死效力，所以F0值又称为标准灭菌时间，适用于热压灭菌法 F0值-生物F0值 将F0值看作是D121值与微生物数量对数降低值的乘积 F0=D121×（lgN0-lgNt） 其中Nt为灭菌后预期达到的微生物残存数，又叫染菌度概率 ，一般取Nt为10-6 生物F0值可认为是以相当于121℃热压灭菌时杀死容器中全部微生物所需要的时间 例如，将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的5％葡萄糖水溶液以121℃热压灭菌时，其D值为2.4分，则F0=2.4×（lg200-lg10-6）=19.92min 由于F0是将不同灭菌温度折算到相当于121℃湿热灭菌时的效力，故F0值可作为灭菌过程的比较参数 为了使F0测定准确，先应选择灵敏度高，重现性好，精密度为0.1的热电偶，并对热电偶进行校验 灭菌时应将热电偶的探针置于被测物的内部，经灭菌器通向柜外的湿度记录仪，有些灭菌记录仪附有F0显示器，在灭菌过程中和灭菌后，自动显示F0值 影响F0值的因素 容器的形状、大小、热穿透系数 灭菌产品溶液粘度、容器充填量 容器在灭菌器内的数量与排布 注意灭菌器内各层、四角、中间位置热分布是否均匀，以便合理排布 为了确保灭菌效果，