第24章病毒感染的检查方法与防治原则1.pptVIP

第二节 病毒感染的特异性预防 二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白：血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂： IFN-α、β、γ 细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 第三节 病毒感染的治疗 （一）抗病毒化学制剂 核苷类药物：阿昔洛韦、阿糖腺苷、齐多夫定（AZT） 非核苷类反转录酶抑制剂：奈韦拉平、吡啶酮 蛋白酶抑制剂：沙奎那韦 其他抗病毒药物：金刚烷胺 （二）干扰素和干扰素诱生剂 （三）中草药防治病毒感染 （四）新抗生素类 （五）治疗性疫苗 （六）治疗性抗体：帕利珠 （七）基因治疗剂：反义寡核苷酸、干扰RNA、核酶 思考题 分离病毒的标本和作血清学诊断的标本各有何要求？ 常用组织培养法有几种？各有何应用？ 病毒在组织细胞中增殖的指标是什么？ 病毒性感染的快速诊断方法有哪些？ 预防病毒性感染有哪些人工自动免疫制剂？ 诊断病毒的核酸技术有哪些？ 教学重点 病毒的培养方法 病毒的诊断方法 病毒感染的防治原则 教学难点 病毒感染的防治原则 川北医学院微生物学与免疫学教研室 生物制品： 微生物及其代谢产物、 动物免疫血清、 免疫细胞、 细胞因子。 防治和诊断感染性疾病 生物制品： 微生物及其代谢产物、 动物免疫血清、 免疫细胞、 细胞因子。 防治和诊断感染性疾病 生物制品： 微生物及其代谢产物、 动物免疫血清、 免疫细胞、 细胞因子。 防治和诊断感染性疾病 第二十四章 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒感染的检查方法 检测内容 查病毒 查特异性抗体 病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察 光镜检查包涵体 分离培养 一、标本的采集与送检 原则基本与细菌相似，还特别注意以下原则： 采集急性期标本 使用抗生素：标本用“双抗”或两性霉素B处理 冷藏保存、快速送检 采集双份血清 二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离培养 细胞培养（cell culture） 鸡胚接种（egg inoculation） 动物接种（animal inoculation） 二、病毒的分离与鉴定 一般程序： 标本 无菌处理 动物接种 鸡胚培养 细胞培养 指标阳性 指标阴性 病毒鉴定 盲传2～3代 指标阴性 病毒阴性 1. 细胞培养 根据生长方式分类： 单层细胞培养（monolayer cell culture） 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 从细胞来源、染色体特征及传代次数分类： 原代细胞（primary cell） 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line） （一）病毒的分离培养 病毒的细胞培养 细胞培养瓶 单层细胞 1.细胞培养 （1）原代和次代细胞培养 组织 组织块 分散的单个细胞 单层细胞 剪碎 培养基 (原代细胞) 单层细胞 (次代细胞) 传代培养 蛋白酶 特点：①对多种病毒敏感 ②生长能力有限, 获取成本高 ③可携带潜伏病毒 （2）二倍体细胞培养 体外分裂50～100代仍保持二倍体染色体数目，可用于病毒分离和疫苗生产。 特点：①对多种病毒敏感 ②不带异种蛋白(人源性) ③不带病毒，无致瘤潜能 ④可传50代左右 1.细胞培养 （3） 传代细胞培养 特点：①对多种病毒敏感性高 ②繁殖能力高，传代时间长 ③有致癌危险，不能用于疫苗生产 1.细胞培养 病毒在培养细胞中增殖的指征： 致细胞病变效应（cytopathic effect, CPE ） 红细胞吸附（hemadsorption） 病毒干扰作用（viral interference） 细胞代谢改变 （一）病毒的分离培养 ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落 （1）致细胞病变效应（CPE） 麻疹病毒感染细胞 呼吸道合胞病毒感染细胞 ②形成多核巨细胞或称融合细胞 （1）致细胞病变效应（ CPE） ③形成包涵体(inclusion body) （1）致细胞病变效应（CPE） 腮腺