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第十三单元——第四章微生物的营养二.ppt
目的:增殖少数 手段:“投其所好” 混合样品 选择性培养基 成为 中劣势菌 优势菌 目的:抑制多数菌 手段:“取其所抗” 选择培养基 基础培养基 + 嗜好营养物 基础培养基 + 抑制剂 抑制剂: 青霉素(抑制G+细菌) 分离G-细菌 抗生素 氯霉素,链霉素(抑制细菌) 分离酵母菌,霉菌 放线菌酮(抑制酵母,霉菌) 分离细菌,放线菌 结晶紫:抑制G+ 分离G- 染料 胆盐:抑制G+ 分离G- 孟加拉红:抑制细菌、放线菌 分离酵母,霉菌 其它 叠氮化钠:抑制霉菌 分离乳酸菌 10%酚数滴:抑制细菌,霉菌 分离放线菌 用于选择性的物理因素有:温度,氧气,pH值,渗透压等 思考题: 在某一自然土壤样品中,已知其中存在有极少量的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、丙酮丁醇梭菌、自生固氮菌和酵母菌,请设计实验方案,把上述五菌一一分离出来。 本章重点 一、微生物所需营养物的种类及功能(六大营养要素;生长因子的种类)。 二、微生物的营养类型(以能源和碳源来划分)。 三、培养基 配制培养基的原则; 四大类微生物常用的培养基; 培养基的分类; EMB培养基的用途、反应原理及大肠菌群细菌特征性的菌落颜色; 特定微生物的筛选方法(选择性培养基,培养条件) 四、营养物质进入细胞的4种方式(特点,比较) 五、名词概念: 培养基,选择性培养基,鉴别性培养基,碳氮比, 生长因子,(化能)自养微生物,(化能)异养微生物 任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素 任何培养基一旦配成,必须立即进行灭菌处理 常规高压蒸汽灭菌: 0.1MPa,(121℃),15-30min; 0.056MPa,(112.6℃),15-30min 有时某些成分进行分别灭菌; 加热容易造成结构破坏的成分需过滤除菌 二、配制培养基的原则 配制培养基的4个基本原则: 1. 营养协调; 2. 物理、化学条件适宜; 3. 目的明确; 4. 经济节约 1. 营养协调 营养物质的浓度适宜; 营养物质之间的配比适宜。 高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑制或杀菌作用。 培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。 C/N比:培养基所含碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的 摩尔数之比。 发酵生产谷氨酸时: C/N比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少; C/N比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。 2. 理化条件适宜 (1)渗透压 (2)pH值 (3)氧化还原电位 渗透压大小由溶液中所含的分子或离子的质点数决定。 等重的物质,如果其分子或离子越小,则质点数越多,因而产生的渗透压越大。 等渗溶液:适宜微生物生长; 高渗溶液:细胞发生质壁分离; 低渗溶液:细胞吸水膨胀 (1)渗透压(osmotic presure)和水活度 (2)pH 培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型 微
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