生物工艺学实验20122013..docVIP

生物工艺学实验 实验一 生物发酵罐的操作实验 [目的要求][实验原理][教学内容]mol/m3左右。在好氧发酵过程中，氧气由气相传递到液相，为微生物消耗。氧的传递过程限速阻力位液膜阶段，此时Kla是描述氧的传递性能的重要参数。 1.目的 掌握利用亚硫酸盐测定容积氧体积传递系数的方法，了解氧传递在好氧发酵过程中的重要作用。 2原理 以Cu离子为催化剂，溶解于水中的O2能立即将水中的SO32-氧化为SO42-，其氧化反应的速度几乎与SO32-浓度无关。实际上是O2一经溶入液相，立即就被还原掉。这种反应特性使溶氧速率成为控制氧化反应的因素。其反应式如下： 2Na2SO3+O2 2Na2SO4 剩余的Na2SO3与过量的碘作用 Na2SO3 + I2 + H2O Na2SO4 + 2HI 剩余的I2用标准Na2S2O3溶液滴定。 I2+ 2Na2S2O3 Na2S4O6+2NaI O2 ~ Na2SO3 ~ I2 ~ Na2S2O3 1 2 2 4 可见，每溶解1mol O2，将消耗2mol Na2SO3，将少消耗2mol I2，将多消耗4mol Na2S2O3。因此可根据两次取样滴定消耗Na2S2O3的摩尔数之差，计算体积溶氧速率。公式如下： 式中 ΔV：两次取样滴定消耗Na2S2O3体积之差， M：Na2S2O3浓度， t：两次取样时间间隔，h V0：取样分析液体积。 将上述NV值代入公式即可计算出kLa 由于溶液中SO3-2在Cu2+催化下瞬即把溶解氧还原掉，所以在搅拌作用充分的条件下整个实验过程中溶液中的溶氧浓度C=0。 在0.1Mpa(1atm)下，25oC时空气中氧的分压为0.021MPa，根据亨利定律，可计算出C*=0.24mmol/L，但由于亚硫酸盐的存在，C*的实际值低于0.24mmol/L，因此一般规定C*=0.21mmol/L。所以kLa=NV/0.21 亚硫酸钠氧化法的优点是不需专用的仪器，适用于摇瓶及小型试验设备中kLa的测定。缺点是：测定的是亚硫酸钠溶液的体积溶氧系数kLa，而不是真实的发酵液中的kLa。 3. 试剂 a. 0.1mol/LNa2S2O3溶液（需要标定），在使用前1-2周配置 b.淀粉溶液：称取1g淀粉，放入100mL的水中加热搅拌煮沸2-3min. c.0.05mol/L的I2溶液：称取30gKI，加入10mL,溶解，再称取19.5g碘搅拌充分溶解，定容1.5L（根据实验用量调节），避光保存。 d. 0.1mol/L硫酸铜溶液 4. 仪器 吸管，50mL三角瓶、酸式滴定管、300-500mL三角瓶。 5. 实验步骤及方法 测定Kla的反应装置，加入适当浓度，如x mol/L（0.05~0.45mol/L）Na2SO3溶液，每升Na2SO3溶液加入1 ml 0.1mol/L硫酸铜溶液.。 在通风搅拌后开始计时（准确秒表）及间隔准确时间取样时，取样量略少于2.5/x,以便于取样为准。取样时注意，迅速取样10ml Na2SO3溶液加入0.05mol/L的I2溶液25ml溶液中。吸管一定要尽可能的靠近碘液液面。然后用标准的0.1mol/LNa2S2O3溶液进行滴定。 6. 实验记录及报告 反应液组成 Na2SO3： mol/L 实验条件 反应器名称及规格 反应液体积 反应温度 转速、绝对气压 两次取样间隔t/s 两次滴定Na2S2O3溶液体积差 Kla（1/h） Kla（1/h）平均值 7. 结果分析 8.思考题 1.实际发酵过程中能否用此法进行测定容积氧传递系数？ 2. 对于几十立方的发酵罐该法是否可行？ 3. 为什么要吸管一定要尽可能的靠近碘液液面 实验三.枯草芽孢杆菌生长曲线测定 自20世纪40年代至今，微生物生理学者和生物化学工程学者提出了许多关于微生物生长的动力学模型。这些生长模型根据Tsuchiya理论可分为 （1）确定论的非结构模型，是一种理想状况，不考虑细胞内部结构，每个细胞之间无差别。 （2）确定论的结构模型，每个细胞之间无差别，细胞内部有多个组分存在。 （3）概率论的非结构模型，不考虑细胞内部结构，每个细胞之间有差别。 （4）概率论的结构模型，考虑细胞内部结构，每个细胞之间有差别。 从工程角度看，理想的微生物生长模型应具备下列4个条件： （1）要明确建立模型的目的。 （2）明确地给出建立模型的假定条件，这样才能明确模型的适用范围。 （3）希望所含有的参数，能够通过实验逐个确定。 （4）模型应尽可能简单。 目前，常使用确定