发酵工业与发酵工程_03发酵原料及培养基制备解读.ppt

二、培养基的种类与选择 （一） 培养基种类 ① 按来源分 天然培养基；合成培养基；复合培养基 是采用化学成分不清楚或化学成分不恒定的各种植物、动物组织或微生物的浸出物、水解液等物质制成的。 合成培养基 是用化学成分和数量完全了解的物质配制而成的。成分精确，重复性强，可以减少不能控制的因素。 适用于在实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、生物测定及选育菌种、遗传分析等定量研究工作。 半合成培养基 多数培养基配制是采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足微生物对营养的需要。 大多数微生物都能在此培养基上生长繁殖。因此，在微生物工业生产上和试验研究中被广泛使用。 常用于大规模的工业生产及生理代谢等基本理论研究工作。 根据微生物对氧的要求情况，分别作静止或通风搅拌培养。 分类：斜面试管、平板等； 是在液体培养基中加入凝固剂配成的，最常用的凝固剂是琼脂。 在菌种的分离、保藏、菌落特征的观察、活菌计数和鉴定菌种方面是不可缺少的。 在制曲、酶制剂、柠檬酸等生产中，用来培养霉菌等的固体种子和发酵培养基是由麸皮等农作物加无机元素等制成的。 孢子培养基 要求：能使菌体生长快，产生孢子数量大、质量好，且不会引起菌种变异。 特点： C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子； 无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。 种子培养基 要求： 营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些； 培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源； pH要稳定； 最后一级尽可能接近发酵培养基。 发酵培养基 目的：使接种菌丝生长并能高效表达，获得高的发酵产量，同时组分尽可能单一，以保证高的得率。 （二）培养基的配制原则 1．选择合适的营养物质 2．营养物质浓度及配比合适 控制合适的pH 氧化还原电位的影响 （三）培养基确定方法 （1）首先必须做好调查研究工作，了解菌种的来源、生活习惯、生理生化特性和一般的营养要求。 （2）其次，对生产菌种的培养条件，生物合成的代谢途径，代谢产物的化学性质、分子结构、一般提炼方法和产品质量要求等要有所了解，以便在选择培养基时做到心中有数。 （3）最好先选择一种较好的化学合成培养基做基础，开始时先做一些摇瓶试验; （5） 有些发酵产物，如抗生素等，除了配制培养基以外，还要通过中间补料法，一面对碳及氮的代谢予以适当的控制，一面间歇添加各种养料和前体类物质，引导发酵走向合成产物的途径。 （6）根据生产和科学研究的需要选择培养基 (7)根据经济效益选择培养基原料 发酵工业中大多采用液体培养基培养种子和进行液体发酵，并根据微生物对氧气的要求，分别作表面静止培养或深层通气培养。 实验室或制种车间进行固体培养常采用试管、扁瓶和培养皿。 * * 第三章 发酵原料及培养基制备 一、发酵培养基中微生物的营养来源 （一）碳源 1、作用 提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分 ； 提供合成目的产物所必须的碳成分。 2、来源 糖类、油脂、有机酸等。 （二）氮源 1、无机氮源 种类：氨盐、硝酸盐和氨水 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。 2、有机氮源 来源：花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体等。 成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机盐及生长因子。 氮源使用的一些相关问题： 有机氮源和无机氮源应当混合使用； 有些产物会受氮源的诱导和阻遏； 有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力； 开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令人感兴趣的课题。 （三）无机盐 1、作用：各种不一样 2、来源：C、N源，以盐的形式补充 3、用量：根据具体的产品，以实验决定。 （四）生长因子、前体和产物促进剂 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。 1、生长因子 前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中合成到产物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。 2、前体 作用：前体有助于提高产量和组份。 产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。 3、产物促进剂 （五）水 水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 天然培养基 适合于各类异养微生物生长，而一般自养微生物都不能生长。 液体培养基； 固体培养基； 半固体培养基 ② 按培养基物理性质分 液体培养基 固体培养基 作用：