生物化口学核酸结构与功能.pptVIP

05-06学年第二学期：中药学04（1，2） 绚丽多彩的生物世界是怎么产生的？成千上万种不同性状和习性生物间有什么关系？这是自古以来，人们追问的问题。 ———— DNA 第 三 章核酸的结构和功能 Structure and Function of Nucleic Acid 核苷酸的命名 AMP adenosine monophosphate 腺苷一磷酸 或 一磷酸腺苷 简称：腺苷酸 dAMP deoxyadenosine monophosphate 脱氧一磷酸腺苷/一磷酸脱氧腺苷 简称：脱氧腺苷酸 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 碱基配对规律（ Chargaff规则） 1950年Chargaff通过研究DNA的分子组成，发现： 不同物种来源的DNA的碱基组成不同 同一生物的不同组织里的DNA碱基是相同的。 DNA中嘌呤碱基等于嘧啶碱基。 即：A+G=T+C;A =T 、G = C “大沟”、“小沟”的功能 沟状结构与DNA、蛋白质间的相互识别有关。 碱基配对规律的合理性 小结：DNA二级结构主要特点 两条脱氧核酸链构成右手双螺旋结构，链的走向相反 磷酸脱氧核糖链在螺旋的外侧，碱基在螺旋的内侧 脱氧核糖平面与碱基平面相互垂直 碱基配对规律：A=T、G?C 稳定力： 横向：氢键 纵向：碱基堆积力 DNA双螺旋结构的多样性 三、DNA的功能 信使RNA的结构与功能 * 真核生物mRNA成熟过程 核酶(ribozyme)一词用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA), 却具有酶的催化功能。核酶的功能很多,有的能够切割RNA, 有的能够切割DNA, 有些还具有RNA 连接酶、磷酸酶等活性。 蛋白质与核酸结构比较 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260（absorbance，A，A260代表溶液在260nm处的吸光率）值作图，所得的曲线称为解链曲线。 密码子和反密码子关系示意图 例：变性引起紫外吸收值的改变 DNA的紫外吸收光谱 增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。 DNA的变性(denaturation) 方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后其它理化性质变化： OD260增高 粘度下降 比旋度下降 浮力密度升高 酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失 DNA热变性： 特点— 骤然、突发式 融解温度Tm(melting temperature) Tm与G+C含量成正比 Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。其大小与G+C含量成正比。 1.DNA复性(renaturation) /退火(annealing) 定义— 复性的条件— 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低。 在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 异亮氨酸 异亮氨酸 反密码子 异亮氨酸 密码子 碱基互补配对 T A G C DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） DNA分子由两条相互平行但走向相反的脱氧多核苷酸链组成，两链以-脱氧核糖-磷酸-为骨架，以右手螺旋方式绕同一公共轴盘。螺旋直径为2nm，形成大沟及小沟相间。 大沟 小沟 DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953） 碱基垂直螺旋轴居双螺旋内侧，与对侧碱基形成氢键配对（互补配对形式：A=T; G?C）。 大沟 小沟 大沟 小沟 DNA双螺旋结构模型要点 （Wat