维生素c设计性实验[精选].doc

维生素C设计性实验设计 ——不同加工方式对水果维生素C含量的影响 一、实验目的： 1.学习和掌握维生素C的提取方法和维生素C的含量测定的原理和方法，加强对对照实验的认识，学习设计对照实验，掌握使用分光光度计法测量样品中维生素c的含量； 2.通过自行设计实验，掌握基础的科研方法和技巧； 3.了解各种深加工对水果中维生素c含量的影响； 4.温度对水果中维生素c含量的影响。 二、实验原理： 维生素C，又称抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，结构式如右图，有氧化型和还原型，在酸性条件下更稳定。 本次实验将对维生素C的各方面的适宜条件进行实验，包括维生素C保持稳定的最适温度、最适pH，以及暴露在空气中对维生素C的影响。本实验初步设计采用分光光度法。 人体中所需的维生素 C 大多由新鲜的水果和蔬菜供给。 由于维生素 C 在空气中很容易被氧化而损失，因此测定果蔬中维生素C的含量对人们日常通过膳食补充维生素C具有科学的指导意义。 三、实验材料： 标准抗坏血酸溶液（0.1mg/mL）：精确称取抗坏血酸（Vc）10mg（准确至0.1mg），用2%偏磷酸溶液溶解并定容至100mL。此溶液应贮存于棕色瓶中，最好现用现配。 新鲜橙子若干； 2%（W/V）偏磷酸溶液； 0.5mol/L NaOH溶液； 四、实验器材： 水浴锅，冰箱，分光光度计、石英比色皿、10mL比色管、组织捣碎机、高速离心机、100mL容量瓶、250mL容量瓶、移液管、吸耳球、玻璃棒，烧杯、试管若干。 五、实验步骤： 1、实验对照设计及实验前期处理 取9份等量100g的新鲜橙子果肉（去皮后装入保鲜袋）分别记为1号、2号、3号、4号、5号、6号7号、8号和9号。分别作如下处理： ①不同温度温度处理橙子后的维生素C含量 将1号放入冰箱冷冻室（低温冷冻处理），2号放在冰箱冷藏室（低温冷藏处理），3号置于室温下（即不处理），4号先室温存放，实验前100℃高温处理2小时。（注意：四组样品均装入保鲜袋中封口，以防止与空气接触。） 两天后，将此4组橙果肉分别绞碎成浆，过滤，得到橙汁原浆；然后测量各组试样中的维生素C含量，（每组测三次分光度值从而计算VC含量），并记录相关数据。相关情况见表01，并将测得的吸光度值及维生素C含量的相关情况填入表01。（表01中的温度具体数值在实验时在进行具体设定）。 ②橙子深加工后对维生素C含量的影响 1、取100g鲜橙果肉，100g橙罐头进行脱水处理，测得其干重a（鲜橙），b（罐头），求得含水量a%, b%； 2、取100g鲜橙果肉绞碎成浆，过滤，得到橙汁原浆c ml； 3、取100g鲜橙果肉（5号），100a/b g鲜橙罐头（6号），a/0.65g橙蜜饯（去皮，7号），a g橙子干（去皮，8号），c/0.30 ml橙汁饮料（橙汁原浆含量30%，另外若有添加V c，应在试验后减去其含量）（9号），分别捣碎，并配置成250 ml待测试液，标记为5，6，7，8，9号试样； 4、将每个试样各取10 ml置于3个试管中，加入试剂，处理后分别测得各组试管的光度值。计算出Vc含量填入表01。 附：表01 编号 1号 2号 3号 4号 5号 6号 7号 8号 9号 温度或其他各种处理方式 —— —— —— —— 鲜橙 蜜饯 罐头 橙子干 橙汁饮料 -20℃低温冷冻 4℃储藏 室温储藏 100℃加热 —— —— —— —— —— 吸光度 △A（A-A0） 第一次 第二次 第三次 平均吸光度 V c含量 2、维生素C含量的测定 ①校准曲线的绘制 称取抗坏血酸10mg (准确至0. 1mg) , 用2% 偏磷酸溶解，小心转移到100mL 容量瓶中，并加偏磷酸稀释到刻度，混匀，此抗坏血酸溶液的浓度为100μg/mL。吸取0. 00、0. 10、0. 20、0. 40、0. 60、0.80、1. 00、1. 20mL 抗坏血酸标准使用溶液, 置于10mL 比色管中；用2% 偏磷酸定容，摇匀。此标准系列抗坏血酸的浓度分别为0. 00，1. 00，2. 00，4. 00，6. 00，8. 00，10. 0，12. 0 μg/mL。以蒸馏水为参比,在波长243nm 处, 用1cm 石英皿测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光度。抗坏血酸吸光度为A , 试剂空白吸光度为A0 , 计算吸光度差⊿A = A – A0 的值。以吸光度差值⊿A 对抗坏血酸浓度C 绘制校准曲线。 ②样品的测定 样液的提取: 将上述9组（4+5）样品处理完毕后, 放入组织捣碎机中, 加入100mL浸提剂, 迅速捣成匀浆。得到浆状样品, 用