专题1基因工程11DNA重组技术的基本工具.doc

选修3 现代生物科技专题 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的概念 【例1】（2013大纲5）下列实践活动包含基因工程技术的是水稻花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦将含抗病基因的重组导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆——“分子手术刀” 【例2】 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是（ ）　　　　 A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 三、 “分子缝合针” —— DNA连接酶 【例3】据右图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（ ） A. 限制性内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处 B. DNA聚合酶可以连接a处 C. 解旋酶可以使b处解开 D. 连接c处的酶可以为DNA连接酶 四、 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 【例4】（2011浙江6）ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A．每个大肠杆菌至少含一个重组质粒 B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 课后练习题 【练1】（2010全国Ⅱ5）下列叙述符合基因工程概念的是（ ） A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 【练2】（2012四川2）将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是（ ） A．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物 B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传 C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等 D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶 【练3】（2013·云南师大附中月考）下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是A．同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具备专一性 B．运载体的化学本质与载体蛋白同 C．限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸 D．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键 ·浙江十校高三联考） A. DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端 B. 细菌细胞中含有的限制酶不能对自身DNA进行剪切 C. 限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端 D. 天然的质粒可以直接用来作为载体 【练6】（2013·无锡期末）现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI，KpnI同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ） 1.2 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 【例1】（2012浙江6）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（ ） A. 提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B. 利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C. 利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D. 将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 二、基因表达载体的构建 【例2】如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，基因PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠSmaⅠ C. 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D. 除图示组成外，表达载体中还应含有启动子、终止子等结构 三、将目的基因导入受体细胞 【例3】（2013江苏22，多选）小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了