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分子生物学复习题目答案.doc 12页

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分子生物学 复习提纲 一.名词解释 1、(1)Ori:原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列 (2)ARS:自主复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的1bp的保守序列。 2、Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板准确地相结合并具有转录起始的特异性。(-independent termination:不依赖(因子的终止,(因子的强终止,“一段反向互补的序列”(RNA折叠形成发夹结构,影响RNA移动速度)+“一段富含T的区域”,没有任何其他因子的参与,核心酶也能在某些位点终止转录。→原核,RNA转录的发夹结构;真核:AATAAA,12bp处↓ 4、(1)SD sequence:序列核糖体小亚基识别位点,存在于原核生物起始密码上游~个核苷酸处的一种~个核苷酸的保守片段,它与’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA上的这段序列,并把它作为翻译起始位点。 Operator:操纵基因,与一个或者一组结构基因相邻近,并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用,从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。Enhancer:增强子,能提高转录起始效率的一段DNA序列。可以位于转录起始点的5’或3’末端,而且一般与所调控靶基因的距离无关。 Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。cis-acting element :顺式作用元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor:反式作用因子,直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 Open reading frame (ORF):开放式阅读框架,是结构基因的正常核苷酸序列,从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链,其间不存在使翻译中断的终止密码子。Gene:基因,能转录DNA denaturation:变性,DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链的过程。 (2)Hyperchromatic effect:增色效应,在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。 DNA Melting temperature (Tm):解温度,变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85~95℃。 RNA splicing:的剪接,Sn RNA)形成剪接体,剪接信号为GU(供体)AG(受体)从mRNA前体分子中切除内含子,而使外显子拼接形成成熟的过程。intron :内含子,中的非编码区。 exon:外显子,中的编码区。 RNAi:RNA干涉,利用双链小RNA的高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失表型的方法。 polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反应,由高温变性92~97℃、低温退火45~55℃复性及适温延伸72℃Taq酶组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以扩增。 Southern blot:DNA印迹杂交,指利用具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图谱,此即DNA印迹杂交。 Northern blot:RNA印迹杂交,首先通过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分,然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。 Western blot:蛋白质印迹,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第

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