重庆市应用基础研究项目申请书-重庆市科委.docVIP

(一)、立项依据 项目研究的重要性、必要性（2000字以内） 人口老龄化是全世界面临的重大课题。我国人口年龄结构在2000年即跨入老年型，比世界总体人口年龄结构提前了10年左右，据预测到2050年，60岁以上人口的比例将由2000年的10.3％上升到35％左右。重庆人口老龄化也十分严重，根据重庆市老龄委办公室的数据，我市60岁以上人口超过465万，占全市人口总数的15%，这个比例远远高于全国老龄化平均水平。人口老龄化为医疗保障事业提出了严峻的挑战，如何更有效地预防衰老和防治老年性疾病，是迫切需要解决的科研和社会问题。 衰老是全身性的、多方面的、十分复杂的、循序渐进的退化过程，研究表明基因调控在衰老过程中发挥着重要的作用。近年来抗衰老基因在老年疾病中的发病机制研究逐渐成为老年医学研究的热点。在众多抗衰老基因中，Klotho基因被认为是最理想的抗衰老基因之一[1]。Klotho基因于1997年由Kuro在研究转基因小鼠时发现。Klotho表达缺陷的小鼠表现出几乎全部与人类衰老类似的表型，如寿命缩短、不育症、动脉硬化、皮肤萎缩、骨质疏松、肺气肿等，给予基因补救治疗后其衰老表型可得到明显改善并延长寿命，提示Klotho基因的表达产物具有抗衰老作用，因而被研究者用希腊神化中掌管生命之线女神Klotho来命名。Klotho基因可通过其表达蛋白发挥激素样作用，通过调控多种细胞信号转导，激活离子通道受体等途径发挥改善胰岛素抵抗和对抗氧化应激，起到抗衰老及预防老年疾病的作用[2－4]。上调Klotho基因表达是预防衰老和防治老年疾病的新途径。 人类Klotho基因变异可明显增加年龄相关疾病的患病率。人类90％的基因变异来源于单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphism, SNP）[5]，近年研究发现Klotho基因有多个SNP位点与临床疾病具有遗传关联。由于Klotho基因是遗传上相对保守的基因，位于编码序列的SNP往往发生在特定的人群，如根据NCBI数据显示（/SNP/snp_ref.cgi?rs=9536314），代表编码序列常见SNP位点的KL-VS在中国汉族人群及日本人群频率为零。位于Klotho基因调控序列的SNP在疾病发生中有更重要的意义。 既往对于调控序列主要集中在G-395A多态性，发现该位点与骨质疏松、冠状动脉狭窄、高血压、认知功能障碍、脑血管疾病等均有相关性，而且通过凝胶电泳迁移率（EMSA）分析显示该位点G/A替换后可影响DNA和蛋白的结合[6]。但既往研究多是针对临床疾病的基因流行病学调查，单一SNP单一人群的研究对不同人种间遗传背景的差异不够重视，针对SNP位点的功能研究不够深入。我们前期工作中发现，在重庆汉族人群中Klotho基因G-395A多态性与动脉僵硬度增高有相关性[4]，初步的功能分析提示G-395A可能是潜在的具有调控意义的SNP位点（regulatory SNP， rSNP）,对这一SNP位点进行功能分析，明确该位点在Klotho基因表达调控中的作用及其机制，有助于老年疾病的早期预防，并为抗衰老药物靶点提供新的理论依据。 主要参考文献： [1] Wang Y, Sun Z. Current understanding of klotho. Ageing Res Rev. 2009, 8(1):43-51. [2] Russell SJ, Kahn CR. Endocrine regulation of ageing. Nat Rev Mol Cell Viol. 2007,8:681-91 [3] Kuro-O M. Klotho and aging. Biochim Biophys Acta. 2009 Feb 18. [Epub ahead of print] [4] Kuro-o M.Klotho as a regulator of oxidative stress and senescence.Biol Chem. 2008,389(3):233-41. [5] Bahlo M, Stankovich J, Speed TP, et al. Detecting genome wide haplotype sharing using SNP or microsatellite haplotype data. Hum Genet, 2006, 119:38-50. [6] Kawano K, Ogata N, Chiano M, et al. Klotho gene polymorphisms associated with bone density of aged postmenopausal women. J Bone Miner Res 2002,1