高效液相色谱法.ppt

第二十二章 高 效 液 相 色 谱 法 第一节 概述 高效液相色谱法（high performance liquid chromatography, HPLC）是20世纪六十年代末在经典液相柱色谱法的基础上引入了气相色谱的理论和技术，采用高压泵、高效固定相以及高灵敏度检测器发展而成的分离分析方法。 第一节 概述 经典柱色谱法流动相是在常压或低压下运行，传质速度慢，所用固定相颗粒粗，柱效低，分离时间长；色谱柱不能连续使用；样品用量大，灵敏度低；除了用于制备分离外，不 能在线检测。HPLC和GC的基本理论一致，定性定量原理完全一样，均可用计算机控制色谱条件和色谱的处理程序进行在线检测。 第一节 概述 HPLC和GC的不同点为： ①流动相不同：GC用气体做流动相，载气种类少，性质接近，改变载气对柱效和分离效率影响小。HPLC以液体做流动相，且液体种类多，性质差别大，可供选择范围广，是控制柱效和分离效率的重要因素之一； ②固定相差别：GC多是固体吸附剂或在担体表面上涂渍液体固定相，且粒度粗。HPLC大都是新型的固体吸附剂、化学键合相等，粒度小（一般为3～10μm）； ③使用范围更广：GC主要用于挥发性、热稳定性好的物质的分析。因此，GC只能分析占有机物总数15%～20%的物质。HPLC可分析高沸点、难挥发和热不稳定的化合物、离子型化合物和高聚物乃至生物