3.1.1 DNA重组技术的基本工具幻灯片.pptVIP

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2017-02-11 发布于浙江
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3.1.1 DNA重组技术的基本工具幻灯片.ppt

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　　 * 1.1 DNA重组技术的基本工具基因工程提取目的基因目的基因与运载体结合目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定 1.1 DNA重组技术的基本工具基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶基因的“针线”—— DNA连接酶基因的运载体 T 磷酸二酯键 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 限制酶的识别序列：专一性！ EcoRⅠ 黏性末端　　　　黏性末端 SmaⅠ 平末端　　　平末端 A-T T-A 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是黏性末端。当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端。（1）来源：主要是原核生物；（2）种类：（3）作用：（4）结果：约4000种；识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键（切点）断开。(6个,4、5、8个) 形成两种末端黏性末端平末端一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” EcoRⅠ 黏性末端　　　　黏性末端 Go back 重复演示相同点模板作用对象 DNA连接酶 DNA聚合酶单个核苷酸形成磷酸二酯键两个DNA片段以一条DNA链为模板不需要模板二、DNA连接酶——“分子缝合针” 1、种类： E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶来源功能大肠杆菌 T4噬菌体恢复磷酸二酯键只能连接黏性末端能连接黏性末端和平末端(效率较低) 相同点差别二、DNA连接酶——“分子缝合针” *