抗体制药.ppt

* * 酶标仪 * 近年来，人们对酶免疫分析法进行了改进，使用生物素—抗生物素蛋白—过氧化物酶复合物做指示剂，组成一个新的生物放大系统，来进一步提高检测的敏感度。该法可用来检测多种抗原抗体系统，如细菌、病毒、肿瘤表面抗原等。一个抗生物素(avidin)分子可以结合4个生物素 (biotin)分子，结合非常稳定。抗生物素和生物素都可与抗体、酶、荧光素等分子结合，而不影响后者的生物活性。 * 一个抗体分子可偶联90个生物素分子，通过生物素又可连接多个抗生物素蛋白，因而大幅度提高检测的敏感度。目前应用生物素—酶标抗生物素蛋白系统(biotin－avidin system—ELISA，BAS ELISA)，来连接免疫反应系统，同时又借助生物素或酶标抗生物素蛋白引入酶与底物反应系统。目前厂家多是出售装配成的试剂盒。 * 3．放射免疫用抗体诊断试剂 放射免疫技术是把放射性核素分析的高度灵敏性与抗原抗体反应的特异性两大特点结合起来建立的检测技术，故其敏感度高，特异性强，能测出ng／mL。在医学实践中，还常用放射自显影法检测微量抗原物质。本法操作简便，且不需检测放射性的专用设备，但需时较久，虽然低浓度的抗原抗体反应生成的沉淀物肉眼不可见，但可借助放射性标记物在片子上感光，经显影定影处理后显现出来。故放射免疫技术广泛应用于医药各领域，是一种重要的研究方法。 * 抗原的测定可用夹心法、间接法和竞争法。 竞争法的基本原理是放射性核素标记的已知标准抗原与待测抗原共同竞争有限数量的特异性抗体。由于抗原抗体反应遵循质量作用定律的原则，而试验时反应系统中加入的标记抗原和抗体的量又是固定的，故形成可溶性抗原抗体复合物中抗原的含量因待测样品的抗原量而改变。 * 若待测样品中有大量的抗原，则复合物中标记抗原和抗体复合物量就少，较多的标记抗原呈游离状态。反之，若样品中抗原其少，则标记抗原大量存在于复合物中，再用适当的方法(硫酸铵沉淀或抗球蛋白抗体结合等)将免疫复合物分离出来，分别测定复合物中标记抗原和游离标记抗原的放射能，从标准曲线上就可以查知待测抗原的含量。 * 三、导向诊断药物 以抗体为载体的导向诊断药物的研究历史很长，而且总的来说，目前比导向治疗药物的研究更接近临床应用阶段。由于肿瘤的特异性小分子抗体尚在研究之中，所以导向诊断药物并没有在临床上广泛应用。放射性核素标记抗体操作简便，放射性核素和抗体用量又小，并能观察肿瘤的位置，故应用广泛。肿瘤放射免疫显像为导向治疗的临床应用提供基础。放射γ射线的放射性核素可用于标记，大量的实验结果为导向治疗提供了有益的资料。 * 放射免疫显像的优点有以下几个：①在体内有确切定位肿瘤的作用，准确性可达90％以上，灵敏度几乎达100％。②在体内可检出0.5cm大小的病灶，并可检出肺、脑等部位的转移灶。③小分子抗体容易到达肿瘤部位，可明显提高T(肿瘤组织)／NT(非肿瘤组织)值。④抗体在肿瘤部位，可保留6～9日。⑥能观察抗体在血中的半衰期和可能出现的不良反应。 * 第六节 抗体治疗药物 一、抗体药物种类： 1. 抗体单独作用：针对细胞表面分子的抗体、细胞因子等； 2. 抗体靶向治疗 * （1）放射性核素标记的抗体治疗药物 抗体作为放射性核素的导向载体，在人体内应用是比较成功的。放射性核素标记抗体的操作简便，放射性核素和抗体的用量小，且能观察到药物在体内的分布和药物动力学，故应用前景好。初步的研究结果证明，放射性核素标记的抗体有较大的杀伤范围，这有利于克服肿瘤表面抗原的异质性，对肿瘤细胞的杀伤也不依赖抗原抗体结合后的吸收作用，放射性核素标记的抗体的分子量又小，更容易穿透到达肿瘤部位。因此，放射免疫治疗是导向治疗中活跃的领域。其缺点是有些放射性核素来源困难，且需放射性保护和污物处理。 * （2）抗癌药物偶联的抗体药物 ① 常用的抗癌药物 主要有氨甲喋吟(methotrexate，MTX)、阿霉素(adriamycin,ADM)、丝裂霉素(mitomycin，MMC)、环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)、新抑癌蛋白(neocarzinostatin, NCS)和正定霉素(doxorubicin，DOX)等。以人血清白蛋白作为中间载体，可明显提高每分子抗体所携带的MTX量，使体外细胞毒性提高2倍，抗体药物偶联物对化学疗法耐药的细胞株仍然有效。 * （3）免疫毒素及其换代制品