仪器分析重点不含四谱法.docVIP

+色谱分析法 色谱分析法的特点： A、混合物最有效的分离、分析方法。色谱分离法一定是先分离，后分析。B、一定具有两相；固定相stationary phase和流动相moving phase。C、分离：利用组分在两相中分配系数或吸附能力的差异进行分离。 D、分离效率高 灵敏度高 分析速度快 应用范围广 E、气相色谱：沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析 色谱法的分类： 1、按两相状态分类：气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱。 2、按操作形式分类 （1）柱色谱： 填充柱色谱—固定相填充到柱管内 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上， 中间是空的。 （2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤 纸上展开进行分离。 （3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。 3、按分离原理分类 （1）吸附色谱：利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。 （2）分配色谱：利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。 （3）离子交换色谱：利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。 （4）凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。 色谱相关术语： 1、色谱图：组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上所产生的信号随时间变化，所形 成 的曲线叫色谱图。记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出曲线. 基线：在实验操作条件下，仅有纯载气通过色谱柱后没有其它组分流出的曲线叫基线。 色谱峰的高度h峰高h —色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm ,mV， mA表示。峰高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好。 峰宽度：1）标准偏差(??)：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。（2）半峰宽(Y1/2)：色谱峰高一半处的宽度 Y1/2 =2.354 ??（3）峰底宽(Wb)：Wb=4 ? 色谱峰面积A ——色谱峰与峰底所围的面积。 对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2 保留值：保留时间（tR）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间； 死时间（t0）：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间； 调整保留时间（tR ＇）：tR＇= tR－t0 保留体积（VR）VR= tR×F0其中，F0 （m L / min）为柱出口处的载气流量 死体积（VM）： V0 = t0 ×F0 调整保留体积(VR＇)： V R＇ = VR －V0 相对保留值r21 组分2与组分1调整保留值之比r21 = t′R2 / t′R1= V′R2 / V′R 相对保留值也叫选择性系数α。后峰比前峰，α≥1 相对保留值只与柱温和固定相性质有关，与其他色谱操作条件无关，它表示了固定相对这两种组分的选择性。 分配平衡： 分配系数K 分配比 k（亦容量因子、容量比） β为相比(填充柱的相比：6～35；毛细管柱的相比50 ～1500) 色谱法理论： 组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制。色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；（两相中的运动阻力，扩散）目前有两种色谱理论：塔板理论和速率理论；塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。所以要用速率理论来解释。 1、塔板理论 分离度R与理论塔板数N的平方根成正比关系，增加塔板数，有利于提高分离度。 增加柱长可增加N，改善分离，但分析时间将大大延长，峰产生扩展。 减小塔板高度H： 根据速率方程的启示制备一根性能优良的色谱柱是十分重要的。根据速率方程选择合适的色谱条件同样有效。 但当容量因子大于10，k/(k+1)的改变不大，而分析时间将大大延长。因此，k的最佳范围是1k10 改变容量因子的方法有：改变柱温 改变相比，即改变固定相的量和改变柱死体积，其中死体积对k/(k+1)的影响很大，使用死体积大的柱子，分离度将受到很大损失。 高液相色谱中改变流动相的配比是最简便、最有效的方法。 α越大，分离效果越好。增大α是提高分离度最有效的手段。 改变柱温也可改变α。 因此在气相色谱中，增大α最有效的手段是改变固定相，选择合适的固定相种类是解决分离问题的关键在高效液相色谱中，流动相的种类和配比是改善分离最简便有效的方法。 2、速率理论 H=A+B/u+Cu 涡流扩散项A：由于柱填料粒径大小不同，粒