111发酵培养基的优化方法与策略专用课件.pptVIP

主要内容 1 微生物培养的类型与功能（分类) 2 发酵培养基的成分及来源 3 培养基优化策略 4 实例 1 培养基的类型及功能 （2）按状态分类 孢子培养基、种子培养基和发酵培养基 要求：使菌体茁壮生长，产生较多的优质孢子 基本配制要求： ⑴ 营养成分不能太丰富，尤其是有机氮。 ⑵ 合适的水分、 pH和盐浓度 生产上常用孢子培养基： 麸皮、大米、小米培养基； 由葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基。 大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因它们含氮少、疏松、表面积大，是较好的孢子培养基。水分控制在21％－25％。（手捏法） 种子培养基是供（孢子萌发）、菌体生长和大量繁殖的培养基。 在种子扩培过程中，各级种子培养基的成分往往不一样。 （种子培养基营养相对比较丰富） 最后一级的种子培养基的成分比较接近发酵培养基。 2 发酵培养基的成分及来源 2 发酵培养基的成分及来源 2.1.1 糖类 A 淀粉： 常用的淀粉有玉米淀粉、甘薯淀粉、小麦淀粉等， 微生物是不直接吸收淀粉的，一些微生物能要产生胞外淀粉水解酶，把淀粉分解成葡萄糖，再进行利用。因此淀粉被利用的速度相对较缓慢， A 淀粉 膨胀：淀粉是一种亲水胶体，遇水加热后，水分子渗入淀粉颗粒的内部，使淀粉分子的体积和重量增加，这种现象称为膨胀。 糊化：在温水中，当淀粉颗粒无限膨胀形成均一的粘稠液体的现象，称为淀粉的糊化。此时的温度称为糊化温度。 老化：糊化了的淀粉在室温或低于室温的条件下慢慢冷却，经过一段时间，变得不透明，甚至凝结沉淀，这种现象称为淀粉的老化。 B 葡萄糖 能被微生物快速利用， 淀粉水解制备（酶法）得到的。 DE值，是英文（dextrose??equivalent）的缩写，是葡萄糖当量或葡萄糖值的意思，糖化液中还原糖含量（以葡萄糖计）占干物质的百分率。是表示，淀粉的水解程度。 C 糖蜜 糖蜜：生产蔗糖时的结晶母液, 糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%～75%。 还含有氮化合物、无机盐、维生素、是一种价廉物美的原料。 因含有大量的胶质成分（起泡、结晶）、钙盐（结晶）、生物素（发酵控制） ，在使用时，常要进行预处理。 不少微生物能产生脂肪酶，在脂肪酶的作用下： 油与脂肪 ?甘油+脂肪酸? CO2 + H2O 常用油脂有：豆油、菜油、猪油、鱼油、棉子油等。 脂肪代谢需要更多的氧气，因此发酵时要供给比糖代谢更多的氧，否则脂肪酸的积累及有机酸的积累，会引起pH下降。 油脂类比较粘稠微生物采用脂肪作为碳源时，发酵液易变粘稠。（油脂有消泡作用） 常用的有机酸有；乳酸、柠檬酸、乙酸等 有机酸有利用常会使pH上升,尤其是有机酸盐氧化时，常伴随着碱性物质的产生，使pH进一步上升。 CH3COONa + O2 ? 2CO2 + H2O + NaOH 微生物能利用碳氢化合物， 如甲烷、乙烷、烷烃。 各种微生物对各种碳源的利用情况不一样，而且代谢途径也是不一样。 微生物多样性。 2.2 氮源 氮源主要用于构成细胞物质（氨基酸、蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。 2.2.1 有机氮源--- 花生饼粉、豆饼粉、棉子饼、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟等。Cl 2.2.2, 无机氮源-- (NH4) 2SO4 , NH4 Cl , NH4 NO3 , KNO3, NaNO3, NH3 2.2.1 有机氮源 成分复杂：除了蛋白质、多肽、氨基酸外，还有少量的糖、脂肪、无机盐、维生素等 玉米浆 Corn steep Liquor 玉米淀粉生产过程中的副产品 ①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸 ②较多的乳酸 ③硫、磷、微量元素等 2.2.2 无机氮源 微生物对无机氮源的利用速度比有机氮源快，因而也被称为快速利用氮源。 氮源的利用可能会引起pH值的变化 (NH4)2SO4 ?2NH3 + H2SO4 NaNO3 + 4H2 ? NH3 + 2H2O +NaOH 生理酸性物质： 经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮（化合物）。如， (NH4)2SO4， NH4 Cl。 生理碱性物质：经微生物生理作用（代谢）后能形成碱性物质的无机氮（化合物）。如KNO3, NaNO3。 选择合适的无机氮源注意事宜： 满足菌体生长 稳定和调节发酵过程中的pH 2.3 无机盐及微量元素  磷(phosphorus)、镁 (magnesium)、硫 (sulphur)、钾(potassium)、钠(sodium)、铁(iron)、氯(chlorine)、锰(manganese)、锌(zinc)、钴(cobalt)、 钙（cal