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微生物工程期末复习资料

《微生物工程复习资料》 什么是微生物工程?它是由哪四大技术结合发展起来?微生物工程:利用微生物特定的性状和功能,通过现代化工程技术生产有用物质或直接应用于工业化生产的技术体系。是将传统发酵与现代DNA 重组、细胞融合、分子修饰和改造等新技术结合并发展起来的现代发酵技术。 微生物反应过程的特点(与化学工程相比) 生产过程通常在常温常压下进行,操作条件温和,不需考虑防爆问题,一种设备具有多种用途;原料以碳水化合物为主,不含有毒物质;能高度选择性地进行复杂化合物在特定部位反应;生产过程是以生命体的自动调节方式进行的,因此多个反应就象一个反应一样,可在单一设备(发酵罐)中进行。能容易地生产复杂的高分子化合物;生产产品的生物体本身也是发酵产物,富含维生素、蛋白质、酶等有用物质;除特殊情况外,培养液一般不会对人和动物造成危害;生产过程中需要注意防止杂菌污染,尤其是噬菌体的侵入,以免造成很大的危害。通过微生物菌种改良,能够利用原有设备使生产飞跃上升。 微生物工程的发展经历哪几个阶段? 经历了传统的微生物发酵技术—天然发酵;第一代微生物发酵技术—纯培养技术;第二代微生物发酵技术—深层培养技术;第三代微生物发酵技术—微生物工程。 微生物工程产品类型有哪些?生物转化的定义与特点 产品类型:微生物菌体的发酵微生物酶发酵微生物代谢产物发酵;生物转化:利用微生物细胞的一种或几种酶,作用于一些化合物的特定部位(基团),使它转变成结构相类似但具有更大经济价值的化合物。 作为发酵工业用的微生物菌种应符合哪些要求?发酵工业常用的微生物是哪四大类?四类:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌。 菌种要求:能在廉价原料制成的培养基上迅速生长,并形成所需的代谢产物,产量高可以在易于控制的培养条件下迅速生长和发酵,且所需酶活力高根据代谢控制的要求,选择单产高的营养缺陷型突变株或调节突变株或野生菌株选育抗噬菌体能力强的菌株,使其不易感染噬菌体菌种纯,不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定性菌种不是病原菌,不产生有害的生物活性物质和毒素,以保证安全; 微生物工程工业生产水平取决于哪些因素?生产菌种的技能、发酵及提纯工艺条件、生产设备。 微生物菌种分离与筛选工作程序分哪几步?利用固体平板的生化反应进行分离方法有哪些? 工作程序:样品采集→增殖培养→纯种分离→生产性能测定; 分离方法:透明圈法、变色圈法、生长圈法、抑菌圈法。 微生物菌种选育的方法有哪些?图示诱变育种的一般步骤。 选育方法:自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合育种、基因工程育种; 诱变育种:原始菌株(出发菌株)-细胞或孢子悬液制备-诱变剂处理-中间培养-突变株分离-初筛-复筛-生产性能试验。 菌种保藏方法中,常用于产孢子和芽孢的保藏的方法是哪一个?现逐渐被哪一种方法取代? 常用保藏方法:沙土管保藏法; 真空冷冻干燥保藏法(不确定)。 微生物酶活性调节的方式有哪些? 共价修饰、变(别)构效应、缔合与解离、竞争性抑制; 酶合成调节的类型有哪些? 诱导、阻遏。 了解酶合成调节的分子机制(乳糖操纵子和色氨酸操纵子) 见课件第二章。 了解分支生物合成途径的调节类型1)同工酶调节 2)协同反馈调节 3)累加反馈调节 4) 增效反馈调节 5) 顺序反馈调节 6) 联合激活和抑制调节 7)酶的共价修饰。 克服反馈调节的方法有哪些?降低末端产物浓度、应用抗反馈突变株。 克服反馈阻遏和克服分解代谢阻遏的方法有哪些?对诱导调节的控制方法有哪些? 克服反馈阻遏方法: 1)营养缺陷型的利用2)渗漏缺陷型的利用3)提高细胞渗透性 克服分解代谢阻遏方法:1)避免使用有阻遏作用的碳源和氮源2)流加碳源或氮源3)利用抗分解代谢阻遏的突变体 对诱导调节的控制方法:1)添加诱导物类似物2)添加辅酶或辅助因子3)利用组成型突变株 代谢工程的定义、目的、研究对象。定义:利用生物学原理,系统分析细胞代谢网络,并通过DNA重组技术合理设计细胞代谢途径及遗传修饰,进而完成细胞特性改造的应用性学科。 目的:通过重组DNA技术构建具有能合成目标产物的代谢网络或具有高产能力的工程菌并用于生产。 研究对象:细胞分解代谢途径、合成代谢途径和膜传输系统的有序组合构成代谢网络。 代谢工程研究的设计思路①提高通向目标产物的代谢流②扩展代谢途径③构建新的代谢途径 代谢工程的基本过程。代谢网络结构的基本类型有哪些?有何区别? 基本过程:1)靶点设计2) 基因操作3)效果分析; 基本类型:依赖型网络、独立型网络 按培养基物理状态来分,大规模发酵工业中,常用哪一种?固体培养基 在发酵工程中,培养基按用途分为哪三种?营养成分的要求有何不同? 孢子培养基:1)营养不要太丰富(特别是有机氮源),否则不易产孢子。2)所用无机盐的浓度要适量,否

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