体外培养物的细胞生物学特点.ppt

生物学特点 体外培养物的细胞生物学特点 总的： 与体内仍有相似-- 体外培养的细胞仍存在细胞和细胞、 细胞和基质的相互关系 但有不同 相对孤立、相对单一 失去原有组织结构和细胞形态 分化减弱或不显 体外培养物的细胞生物学特点 与体内仍有相似--体外培养的细胞 仍存在细胞和细胞、细胞和基质 的相互关系 体外培养 单个细胞也能生存和增殖 但单个细胞不是细胞永久存在的形式,  培养的细胞之间仍有在形态和机能上的 相互依存关系 1.培养的细胞之间 仍有在形态和机能上的相互依存关系。 在结构上，如： 上皮细胞仍见有桥粒 在生理活动上， 单个细胞虽能生长繁殖,  但不如群体细胞能力强， 当相邻细胞接触，便导致运动停止 细胞相互沟通生物信息的结果 2.培养的细胞和基质之间 对细胞外基质仍有依存性 但有不同 人工所模拟的条件与体内实际情况 仍不完全 相同  当细胞被置于体外培养后 久了,必然发生变化与体内主要不同 相对孤立、相对单一 缺乏体内的一些影响 主要表现 失去原有组织结构和细胞形态 如：肌肉细胞—纤维化 分化减弱或不显 出现类似“返祖”现象：细胞趋向单一化  或获得不死性 或变成具有恶性性状的细胞群 因此要正确认识体外培养细胞 是一种特定条件下生长的细胞群体 培养细胞的主要的生物学特点 1.去分化2. 贴壁和铺展3. 接触抑制和密度依赖性 去分化 体外培养物的细胞生物学特点 体外培养生长生物学特征具有两重性 基本生物学特征 仍与体内的细胞相似 培养物在体外条件下生长， 许多生长生物学行为发生改变 培养细胞分化状态的变化 去分化(脱分化):各种分化细胞，逐渐失去各自的形态与功能“个性”，表现出某种趋同性 如: 培养的成纤维细胞  在适当刺激下，可分化为 其它结缔组织细胞和肌组织细胞， 表现出类似未分化的间充质细胞的特性，‘返祖’ 有2点 1.但,去分化并不意味着完全返回胚胎时期的原始细胞状态如:高度分化的神经细胞和心肌细胞 已经丧失的增生活性不可能恢复 但已经具备的生物电活动特性 不会完全失去 2. 可重新表现出分化特点 如：把表皮细胞放在气液界面上培养，可分化成 含大量角蛋白丝的角质细胞 内皮细胞--但，这种能力会随着培养时间延长  逐渐丧失总之，休外培养,使细胞 结构与功能上的“可塑性”增大  防止去分化 贴附和铺展 贴附(粘附)和附着 粘附于固相表面是锚定依赖性细胞生命活动的基本要求细胞被接种到培养器皿内以后首先要发生粘附(adherence)， 是细胞培养以后能否成功的第一步.细胞悬液后 耽搁得越久，越容易发生退化提供什么样的生长表面 是细胞能否成功粘附的主要因素。 不同细胞的粘附能力不同 如巨噬细胞、成纤维细胞等粘附能力强 能在数分钟至数十分钟内粘附到固相表面 如神经元细胞、羊水细胞，粘附能力弱 需要数小时乃至更长的时间才能粘附到固相表面 粘附能力强的细胞--- 粘附能力弱的细胞--- 可利用此特点（粘附：快、牢；慢、弱） 分离、纯化细胞 细胞形态因是否贴附于底物而不同悬浮的细胞: 基本圆形粘附和贴壁的细胞: 扁平圆形 相差显微镜 “亮圈” 很快过渡-- 贴附过程 ：3步 贴附因子粘附 细胞开始附着 细胞进一步牢固附着—伸展 影响因素 各种细胞不同 如接种30’后…第二瓶30’… (附着最强)巨噬细胞一成纤维细胞 ——上皮细胞——血细胞(最弱) 生物因素 血清、培养液中的促附着因子 机械，物理等其他因素因素 离心：促进附着