第一节概述第二节脂溶性维生素的测定第三节水溶性维生素的测定.pptVIP

第七节 维生素的测定 第一节 概 述 第二节 脂溶性维生素的测定 第三节 水溶性维生素的测定 2006年9月雅培4款婴儿液态奶食品在美被召回 美国食品和药品管理局(FDA)称，这些液体奶实际含有的维生素C并未达到产品标签上所示的含量。 第一节??概 述 维生素是调节人体各种新陈代谢过程必不可少的重要营养素。人体如从膳食中摄入维生素的量不足或者机体由于某种原因吸收或合成发生障碍时，就会引起各种维生素缺乏症。近几年已经查明仅有少数几种维生素可以在体内合成，大多数维生素都必须由食物供给。 样品的前处理 水溶性Vit:VB1,VB2可能与蛋白质,淀粉等结合在一起,一般可通过酸水解或酶水解使其游离出来,然后进行提取,纯化和测定. 脂溶性Vit:样品 →皂化→脂溶性Vit和皂化物→过滤→有机溶剂抽提→浓缩→溶于适当溶剂→测定. VA、VD、VE、与类脂物一起存于食物中，摄食时可吸收，可在体内积贮。 脂溶性维生素具有以下理化性质： 1.溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。 2.耐酸碱性：维生素A、D对酸不稳定， 对碱稳定，维生素E对碱不稳定，但在抗氧化剂存在下或惰性气体保护下，也能经受碱的煮沸。 3．耐热性、耐氧化性 耐热性 氧化性 VA 好，能经受煮沸 易被氧化 （光、热促进其氧化） V D 好，能经受煮沸 不易被氧化 V E 好，能经受煮沸 在空气中能慢慢被化 （光、热、碱促进其氧化） 维生素A的测定 维生素A存在于动物性脂肪中，主要来源于肝脏、鱼干油、蛋类、乳类等动物性食品中。 植物性食品中不合VA，但在深色果蔬中含有胡萝卜素，它在人体内可转变为VA，故称为VA原。 维生素A的测定常用的方法有三氯化锑比色法、紫外分光光度法、荧光分析法、液相色谱法。 （1）原理 在氯仿溶液中，维生素A与三氯化锑可相互作用，生成蓝色可溶性配合物，其颜色深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该物质在620nm波长处有最大吸收峰，其吸光度与维生素A的含量在一定的范围内成正比，故可比色测定。 （2）试剂 ① 无水硫酸钠 不吸附维生素A ② 乙酸酐 ③ 无水乙醚 不含过氧化物 ④ 无水乙醇 不含醛类物质 ⑤ 三氯甲烷 不含分解物 ⑥ 250g／L三氯化锑一三氯甲烷溶液 ⑦ 1：1氢氧化钾溶液 ⑧ 0.5mol／L氢氧化钾溶液 ⑨ 维生素A标准溶液 ⑩ 酚酞指示剂 （3）操作步骤 ① 样品处理 ② 标准曲线的绘制 ③ 样品测定 样品处理（皂化法） 1、皂化：称取0.5～5g样品于圆底烧瓶，加入10mlKOH、5ml抗坏血酸钠及20～40ml乙醇，在沸水浴上回流30min。使皂化完全，皂化结束分别用5mL乙醇，5mL水自冷凝管顶部冲洗其内部，取出烧瓶冷却至40℃。 2、提取 将皂化后混合物移至500ml分液漏斗，用30ml水冲洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗，用50ml乙醚分两次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗。振摇并注意放气。静置分层后，水层（在下）放入第二个分液漏斗。皂化瓶再用30ml乙醚分两次清洗，洗液注入第二个分液漏斗。振摇后，静置分层，水层（在下）放入三角瓶，醚层与第一个分液漏斗合并。重复至水层上无黄色醚层。 3、洗涤 用约30ml水加入第一个分液漏斗，轻轻振摇，静置片刻，去除水层，加入15～20ml0.5mol/L KOH于分液漏斗，轻轻振摇，弃去下层碱液。继续用水（30ml）洗涤三次，直至洗涤液与酚酞指示剂呈无色为止。静置醚层10～20min。 4、浓缩 醚层经无水硫酸钠滤入三角瓶，再用约25ml乙醚冲洗分液漏斗和硫酸钠两次。置水浴上蒸馏，回收乙醚。等乙醚完全挥发，立即加入一定量三氯甲烷，用于测定。 前处理:样品 →皂化→ 乙醚萃取→ 上层洗涤→ 浓缩脱水(用无水硫酸钠)→ 氯仿定容。 皂化：加入KOH和乙醇并加热回流至溶液澄清透明。 乙醚提取：用乙醚提出皂化液，放入分液漏斗静置后，放掉水层，保留乙醚层。重复几次。 洗涤：用水对乙醚混合液进行洗涤，弃去水层，多次重复洗涤。 浓缩：用无水硫酸钠脱水，并回流回收乙醚后加入一定量的三氯甲烷，进行定容。 标准曲线的绘制：用标准的维生素A溶液进行绘制 样品的测定：加入处理好样品溶液加入三氯甲烷进行吸