REACH法规 第五卷译稿-【DOC精选】.docVIP

C.1. 鱼急性中毒 方法 1.1. 引言 本测定方法用于导致淡水鱼急性中毒致死化学物质的测定。因此有必要尽可能掌握这些物质的水溶性、蒸汽压、化学稳定性、溶解常数和生物降解率等数据，从而有助于筛选最合适的测定方法（静态，半静态和流动法），保证测定过程中被测物浓度较为恒定。 在设计测定方法和分析结果时还应考虑到其它信息（例如:结构式，纯度，主要杂质的种类和百分比，添加物的存在和数量和正辛醇/水分配系数）。 1.2.定义和单位 急性中毒指的是接触某种化学物质很短时间在某些组织中产生的明显的不良反应。在本测定中，急性中毒的衡量标准用平均致死浓度(LC50)来表示,即在给定时间内导致50％数量的被测定鱼死亡的接触物质的浓度。 所有测定物质浓度用重量体积比表示（mg/L）。也可以用重量比（mg/kg）表示。 1.3.参考物质 可以作为测定的参考物质指的是在实验室测定条件下，测定物的响应信号没有显著的变化。 本测定没有特别规定参考物质。 1.4.测定方法原理 极限测定需用100毫克每升进行测定从而保证LC50值大于此测定浓度。 分别将鱼置于一系列含有不同试验浓度的水中96小时，至少每隔24小时记录死亡率，如果可能在每个观察时间，计算致死50％鱼的物质浓度(LC50)。 1.5. 定量标准 定量标准适用于极限测定和整个测定方法和过程。 直到实验结束，对照组的死亡率不能超过10％（或总数不超过十条鱼中的一条）。 自始至终，溶解氧浓度必须大于空气饱和量的60％。 本实验过程中，测定物质的浓度应保持在起始浓度80％之内。 对于那些易溶于测定介质体的物质，即溶解后形成稳定的溶液而不发生显著的挥发、降解、水解或吸收的，可认为起始溶液浓度为名义浓度值。要有证据能表明整个测定过程中浓度保持稳定并符合定量标准。 对于以下物质： (i) 在测定介质中溶解性差，或 (ii) 能形成稳定的乳状液或分散液的，或 (iii) 在水溶液中不稳定的， 起始浓度应在测定开始时在溶液中进行测定（或者，若技术条件不允许，应在水柱中测量）。浓度测定应溶解平衡一段时间后进行，但应在加入测定鱼之前。 在这些情况下，在测定中应采取进一步措施确定接触物质的实际浓度，满足定量标准。 pH值变化不应超过一个单位。 1.6.测定方法描述 分为以下三种方法： 静态测定： 毒性测定过程中测定溶液没有水流产生 (溶液在整个测定过程保持不变) 。 半静态测定： 测定过程中溶液没有水流产生，但每隔一较长时间（如24小时）测定溶液进行更换。 流动测定： 在测定通道中，测定溶液不断进行更新，测定物质随溶液不断更新测定介质。 1.6.1.试剂 1.6.1.1. 测定物质溶液 一定离子强度的储备液用去离子水或符合1.6.1.2标准水溶解测定物配制。 测定所需浓度的溶液用储备液稀释配制，如果测定的是高浓度的，可直接将物质溶于水。 通常测定的物质浓度取决其溶解度。对一些物质（其水溶解度低或有高Pow值或形成的溶液实际为稳定的分散液的），可以不受其溶解度所限进行测定，从而保证获得其最大的可溶/稳定浓度数据。需要注意的是，该浓度下测定系统不被破坏。 超声波分散，有机溶剂，乳化剂或分散剂可辅助用于一些水溶性差的物质储备液的配制，或有助于物质在介质中的分散。当使用这些辅助物质时，测定浓度应包括相同数量的辅助物质，同时对照组中测定鱼也应使用相同数量的辅助物质。辅助物质的浓度应尽可能低，任何情况下不得大于100毫克每毫升。 测定过程中pH值不应改变。如果有显著证据表明pH值发生了变化，建议调整pH值重新进行测定并报道结果。在这种情况下，除非有特殊原因储备液的pH值应调整至稀释水的pH值。最好用HCL和NaOH调节pH值。pH值调节过程中，储备液中被测物的浓度不应发生显著变化。如果调节过程中，测定化合物发生化学反应或物理沉淀现象应予以记录。 1.6.1.2.贮存和稀释用水 使用Orinking供水设备(未被潜在的有毒的氯、重金属或其它物质污染)，品质优良的天然水或再造水（见附录 I）。水总硬度在10 mg/L 和250 mg/L之间（以CaCO3为参照)，pH值在6.0和8.5之间。 1.6.2.仪器 所有实验仪器用化学惰性材料制成。 － 自动稀释系统（用于流动测定）, － 测氧计, － 水硬度测量装置, － 合适的温控装置, － pH计。 1.6.3.鱼样 测定选用的鱼应是健康的，没有显著变形的。 选择的鱼种类符合通常的标准，例如常年容易获得，便于保存，易于测定，对化学物质敏感同时也要考虑到任何经济、生物和生态所能承受的因素。在挑选鱼的种类时还要对已知数据和现存国际通用准则（见参考 1）进行比较。 附录 2 给出了建议用于测定的一系列鱼的种类。斑马鱼和虹鳟鱼首选。 1.6.3.1. 储存 测定应选择同一批相同长度和年龄的