微生物浸入试验.doc

类别：技术标准 冻干生产线压塞、扎盖密封系统完好性验证 编码： 部门：生产技术部 页码：共4页，第1页 类别：技术标准 冻干生产线压塞、扎盖密封系统完好性验证 编码： 部门：生产技术部 页码：共4页，第2页 类别：技术标准 冻干生产线压塞、扎盖密封系统完好性验证 编码： 部门：生产技术部 页码：共4页，第3页 类别：技术标准 冻干生产线压塞、扎盖密封系统完好性验证 编码： 部门：生产技术部 页码：共4页，第4页 表1：微生物营养性试验检测记录 接种日期 接种人 接入菌种 培养天数 检查观察结果 检查人 复核人 表2：冻干生产线压塞、扎盖密封系统完好性试验结果记录 加塞扎盖时间 营养性试验结论 试样浸泡时间 试样培养时间 浸泡前菌液浓度 浸泡后菌液浓度 培养结束后试样容器内微生物的生长情况记录 序号 A组 B组 阳性对照 序号 A组 B组 阳性对照 1 16 2 17 3 18 4 19 5 20 6 21 7 22 8 23 9 24 10 25 11 26 12 27 13 28 14 29 15 30 注：有微生物生长“+” 无微生物生长“—” 密封口有缺损作详细记录 8.试验步骤 8.1.试验用培养基的制备。 8.1.1.在生产线上取足够量西林瓶灌装SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基，在冻干生产线上压塞扎盖将西林瓶密封。 8.1.2.将密封良好的西林瓶取出，每一西林瓶倒转，使培养基与容器内表面充分接触，并小心去除至少50个试样的铝盖，注意不要破坏其密封口（将去铝盖时不慎损坏容器密封性的所有试样剔除），在30~35℃下竖放培养14天。 8.1.3.接受标准：在培养期内，各试样不生长菌。8.2.确认培养基促菌生长能力----营养性试验 8.2.1.所有试样培养14天均不长菌时，随机取出20个带盖试样，每个试样内接种0.1ml的铜绿假单胞菌ATCC9027，菌液浓度：10~100CFU/0.1ML 8.2.2.在30~35℃下培养7天，或培养至所有试样都呈阳性结果。 8.2.3.若7天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样中，微生物生长良好，则容器内培养基的促菌生长能力合格。 8.2.4.可是使用革兰染色和紫外灯下肉汤呈蓝绿色荧光的性质，来鉴定并确认试样容器内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌。 1.目的： 1.1.2.编制依据： 2.1 .《药品生产质量管理规范》2010年版 2.2 《中国药典》2010年版二部3.支持性文件： 标 题 文件编号 存放地点 4.概述： 4.1. 5.范围： 本确认方案适用于本公司。 7.时间安排 年 月 日 ——— 年 月 日 8.4.9.如果容器中长菌，利用革兰氏染色法鉴定所长菌为铜绿假单胞菌；如果容器中不长菌，则从浸过菌悬液的A组取10个试样，B组取5个试样，分别进行微生物营养性试验。 注1：在实验的过程中所有的营养试验必须都合格，这样试样的挑战试验才有效果。 注2：挑战试验所用菌悬液需经过灭菌后丢弃。 注3：在培养期内，发现任何带盖试样长菌时，则试验无效，须弃去全部试样，重新从头开始。 8.4.1.将新鲜的铜绿假单胞菌ATCC 9027菌悬液倒入合适的盆中，用金属支架固定试样容器，使试样倒置在菌悬液中。 8.4.2.将50个经过冻干线的抽真空、压塞、扎盖的西林瓶的试样倒置入菌悬液中，该组试样记为A组。同时，将25个去除铝盖的试样容器倒置入菌悬液中，该组试样记为B组。（试样容器内的无菌培养基应充分接触封口内表面，样品的颈部及封口的外表面应完全浸泡在悬液中）。 8.4.3. 实验开始时取一份菌悬液，平板计数每毫升所含的活菌数，并通过革兰染色方法确认微生物是铜绿假单胞菌。 8.4.4.将A组及B组试样容器在菌悬液中持续浸泡约4小时。 8.4.5.浸泡结束时，利用平板计数法计数