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声动力治疗巨噬细胞通过促进atp释放趋化单核细胞科研训练论文1
单位代码:10226 学号:2009172057
分类号: 2009172033
2009172075
哈尔滨医科大学
七年制学生基础阶段
科研训练论文
题 目 : 声动力治疗巨噬细胞通过促进ATP释放趋化单核细胞
学科、专业 : 病理生理学教研室
学 生 姓 名: 曹博然 张翰 赵雪竹
指 导 教 师: 田野 教授
指 导 研 究 生: 孙鑫 郭淑媛 陈海波
二○一二年七月
目 录
目 录 1
中文摘要 2
Abstract 3
文献综述 5
前 言 12
材料与方法 13
技术路线 15
结 果 16
讨 论 19
结 论 21
致 谢 21
参考文献 22
中文摘要
目 的:证明声动力治疗(sonodynamic therapy,SDT)巨噬细胞能够趋化单核细胞的聚集并探讨其机制。
方 法:将实验对象分为对照组、SDT组、ATPase组及SDT-ATPase组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞,而SDT组是在对照组基础上加入终浓度为15μg/ml的5-氨基酮戊酸(5-Aminolevulinic acid, ALA),孵育2小时后接受声动力治疗。ATPase组及SDT-ATPase组则是分别在对照组和SDT组基础上加入ATPase。将实验对象离心后取其细胞上清液并分别用transwell方法研究其对单核细胞的趋化作用;将实验对象分为对照组、SDT组、zVAD-fmk组及SDT-zVAD组。其中对照组为单纯THP-1源性巨噬细胞,SDT组是在对照组基础上加入 ALA,孵育2小时后接受声动力治疗。zVAD-fmk组及SDT-zVAD组则是分别在对照组和SDT组基础上加入N-苯甲基氧化碳酰-缬氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-氯化丙酮(zVAD-fmk)。将实验对象离心后,分别用荧光素酶方法检测细胞上清及细胞内ATP量的变化。
结 果:用transwell方法研究声动力治疗后的细胞上清对单核细胞的趋化作用时,从募集的单核细胞数量来看,声动力治疗组明显高于对照组(p0.05),加入ATPase并进行声动力治疗组与声动力治疗组相比显著降低,对照组与ATPase组无统计学差异(p0.05);用荧光素酶方法,检测声动力治疗巨噬细胞后及加入凋亡抑制剂后细胞上清及细胞内ATP量的变化得出:声动力治疗组明显高于对照组,约为其3倍(p0.05);加入zVAD-fmk并进行声动力治疗组较声动力组显著降低;对照组与zVAD-fmk无统计学差异(p0.05)。
结 论:声动力治疗巨噬细胞通过促进凋亡相关的ATP释放趋化单核细胞
关键词:ATP 动脉粥样硬化 声动力疗法 巨噬细胞
Abstract
Purpose: This paper is designed to investigate the effects of monocytes recruitment after sonodynamic therapy and delve into its mechanism.
Methods: The subjects were divided into four groups: The control group,the SDT group, the ATPase group and the SDT-ATPase group.The control group merely contains THP-1 derived macrophages.The SDT one,containing macrophages and sonosensitizer ALA ,was incubated with fresh medium for 6 h before being exposed to pulse ultrasound irradiation. The ATPase group was a mixture of the control group and ATPase. Similarly,the SDT-ATPase group , was
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