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叶酸对宫内发育迟缓仔  猪肝脏基因表达影响 四川农业大学动物营养研究所 主要内容 1.选题背景 1.选题背景 叶酸调节一碳单位代谢 叶酸对DNA甲基化及基因表达影响 IUGR对一碳单位代谢相关基因表达影响 2.研究目的及意义 研究意义 完成本研究可为认识和深入研究母体叶酸营养对IUGR仔猪肝脏一碳单位代谢和基因表达影响积累资料。 为通过营养途径解决IUGR对胎儿后天生长发育影响奠定基础。 3.试验设计 测定指标及方法 ①放疫法测定分娩仔猪血清叶酸含量。 ②荧光定量PCR检测目的基因相对表达量。 一碳单位代谢相关基因 甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT1A，MAT2A) DNA甲基化转移酶-1(DNMT-1) 亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) 胱硫脒-β-合酶(CBS) 能量代谢与氧化应激相关基因 过氧化物酶增殖物激活受体(PPARα, PPARγ ) 糖皮质激素受体(GR) 瘦素受体(ob-R) 乙酰辅酶A氧化酶(AOX) △Ct计算目的基因相对表达量，SPSS13.0统 计软件进行方差分析和多重比较。 4.试验结果与讨论 添加叶酸对血清叶酸含量影响 血清叶酸含量 (nmol/L) 对照组(C，叶酸1.3ppm) 处理组(F，叶酸30ppm) NBW+C IUGR+C NBW+FS IUGR+FS 19.24±1.26B 18.23±1.65B 27.30±1.58A 25.65±1.81A 同行标注大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)，小写字母不同表示差异显著 (P<0.05)。下表（图）同。 叶酸对一碳单位代谢相关基因表达量影响 叶酸对能量代谢相关基因表达量影响 大鼠上研究显示母体添加叶酸影响后代肝脏PPARα 基因表达量，但对PPARγ无显著影响。 本次试验以猪作为研究对象，发现叶酸影响仔猪肝 脏PPARγ基因表达量，但对PPARα无显著影响。 说明叶酸对基因表达调控具有物种特异性。 CBS和ob-R基因表达量主要受体重影响，叶酸添加 无改善效应。 CBS和ob-R基因表达调控受内分泌影响，妊娠期养 分摄入决定激素分泌，体重是养分摄入的体现。 叶酸改变ob-R基因表达量，但不同猪种之间存在差异。 5.结论 四川农业大学动物营养研究所 LOGO 刘静波 选题背景 研究目的及意义 试验设计 试验结果与讨论 结论 1 2 3 4 5 哺乳动物胚胎 或器官妊娠期 生长发育受损 <66%平均体重 猪 15-20% 分子机制 基因组甲基化模式异常 相对稳定改变基因表达 影响 存活率,生长性能,养分利用率 胴体组成及长期健康状况 原因 疾病 胎盘功能异常 环境应激 养分摄入不足 宫内发育迟缓 (IUGR) 叶酸 一碳单位代谢的重要辅因子可通过调节蛋氨酸循环影响基因组甲基化模式。 DNA甲基化 一碳单位与基因组 ‘’CG岛‘’ C上第五个C原子的共价结合。 影响 改变染色体构象，影响转录因子与基因启动子的结合，从而调控基因表达。 C -- Control R -- Maternal protein restriction RF-- Maternal protein restriction + folic acid ①验证不同诱导宫内发育迟缓途 径对基因表达影响是否存在差异。 ②研究叶酸对基因表达调控 是否具有物种特异性。 ③探索母体添加叶酸是否可改善IUGR 对肝脏一碳基团代谢负面影响。 对照组(C) 12头母猪 基础饲粮 叶酸1.3mg/kg 8头 NBW 8头 IUGR 妊娠母猪 试验组(FS) 12头母猪 基础饲粮+叶酸 叶酸30mg/kg 8头 NBW 8头 IUGR 基础饲粮参照NRC(1998)配制,常规饲养管理 NBW 1.4-1.5kg IUGR 0.8-0.9kg 结 论 叶酸对基因表达调控具有基因特异性,物种间存在差异 增加妊娠母猪饲粮叶酸含量可在很大程度上缓解IUGR对仔猪肝脏基因表达影响 自然情况下发生IUGR显著影响新生仔猪肝脏一碳单位代谢和能量代谢相关基因表达量