10细胞核试卷.ppt

Lampbrush chromosome （六） 间期染色体 非随机分布，不同染色体具有各自的分布域，称为染色体域（chromosome territory）。 基因密度高的染色体（如19号）分布于核中心，基因密度低的（如18号）分布于核的周边区域。 同一染色体上，活动染色质可能位于细胞核的中心、远着丝点区域、或形成疏松的环状结构。 (a) 12号染色体红色; 14号黄色; 15号绿色，（注意同源染色体的分布）； (b,c) 12 号染色体绿色, 14号红色 ，15号蓝色； (d)染色体域模式图 小鼠淋巴细胞染色体的空间分布（LA. Parada 和T Misteli 2002） 第三节 核仁 间期细胞核内呈圆球形的结构，一般1~2个。功能是转录rRNA和组装核糖体亚单位。 蛋白合成旺盛和分裂增殖较快的细胞有较大和较多的核仁，反之核仁很小或缺如。 核仁在分裂前期消失，末期又重新出现。 一、核仁形态 ①纤维中心：是致密纤维包围的低电子密度的圆形结构，主要成分为RNA聚合酶和rDNA。 ②致密纤维组分：呈环形或半月形包围FC，由致密纤维构成，是新合成的RNP。 ③颗粒组分：由直径15-20 nm的颗粒构成，是不同加工阶段的RNP。 Nucleolus （一）结构 含40%蛋白、60%RNA，2亚单位构成。分为70S和80S两类。 大小亚单位只在合成蛋白时结合在一起，合成终止后解离。 多个核糖体结合在一条mRNA上，称多聚核糖体。 二、核糖体ribosome 核糖体的组成 Protein Synthesis （二）核糖体组装 rDNA为重复基因，人体细胞中约有200个拷贝，rDNA没有组蛋白核心，是裸露的DNA节段，相邻基因之间为非转录的间隔DNA。 转录时RNA聚合酶沿DNA分子排列，产物排列呈羽毛状。rRNA首先出现在纤维部，而后转向颗粒部。 新合成的45SrRNA形成RNP。甲基化后经RNA酶裂解形成18s、28s、5.8srRNA。成熟的rRNA仅为45srRNA的一半，丢失的大部分是非甲基化和GC含量较高的区域。 5SrRNA定位在常染色体，合成后被转运至核仁区参与大亚基的装配 。 第四节 核骨架nucleoskeleton 核基质（nuclear matrix ）或称核骨架，为真核细胞核内的网络结构，是指除核被膜、染色质、核纤层及核仁以外的核内网架体系。 （一）核基质的组成 ①非组蛋白性纤维蛋白，10多种次要蛋白，包括肌动蛋白和波形蛋白，后者构成核骨架的外罩。已知三种支架蛋白（SCⅠ、SCⅡ、SCⅢ)，SCⅠ是DNA拓朴异构酶Ⅱ。 ②少量RNA（0.5%）和DNA(0.8%，MAR) 。 ③少量磷脂（1.6%）和糖类（0.9%）。 （二）核骨架的功能 1. DNA复制：提供DNA聚合酶结合位点 。 2. RNA复制：提供RNA聚合酶结合位点。 3. 与染色体构建有关 30nm的染色质纤维就是结合在核骨架上，形成放射环状的结构，在分裂期进一步包装成光学显微镜下可见的染色体。 Chromosome Structure * Kinetochore Attachment site for spindle microtubules DNA/ protein structure Required for proper chromosome segregation 二、从DNA到染色体 核小体（nucleosome）：一种串珠状结构，由核心颗粒和连结线DNA两部分组成，通过酶消化实验建立。 核小体单位包括约200bp的DNA、一个组蛋白核心和一个H1。 由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒； DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合； 相邻核心颗粒之间为一段60bp的连接线DNA。 在低盐亲水介质中展开的染色质，示串珠状的核小体（JA，Gall 1981） 通过核小体长度压缩7倍，形成11nm纤维。 电镜下观察用温和方法分离的染色质是直径30nm的纤维，有两种解释：①由核小体螺旋化形成，每6个核小体绕一圈，长度压缩6倍；②由核小体纤维Z字形折叠而成，长度压缩40倍。 solenoid 对更高级染色体包装方式，至今尚不明确。 目前多认为30nm的纤维折叠为一系列的环（loop）结合在核骨架上（或称染色体骨架），结合点是富含AT的区域 。 Chromatin Packing Chromatin Packing Nucleoid spread with 2 long axes made up of bundles of fibres Radial loops of chromatin in undisrupted chromosomes human