2016光合作用复习概要.ppt

色素提取和分离实验 色素提取和分离实验 利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性，可用丙酮、95%乙醇提取。 分离色素的方法有多种，如纸层析、柱层析等。纸层析是其中最简单的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时，由于混合色素中各种成分在两相(即流动相和固定相)间具有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的各种成分得到分离。 实验步骤 叶绿体色素的提取与分离 ①称取新鲜去大叶脉的菠菜叶片（或其他植物叶）2g，剪碎放入研钵中，加入乙醇5ml、少许CaCO3(中和细胞中的酸防止Mg2+从叶绿素中心释放)和石英砂，研磨成匀浆，再加入适量的乙醇（5-10ml），然后用漏斗过滤，即得叶绿体色素液。 ②取准备好的滤纸条（2*20cm）,将其一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条。 ③用毛细管吸取叶绿体色素提取液点于滤纸的下端窄条的上方中央，注意下一次所点溶液不可过多，如色素过淡，用电吹风吹干后再重复1-2次。 ④在大试管中加入汽油5-10ml(或其它层析液，如石油醚:丙酮:苯为20:2:1的混合溶液可作层析液)。然后滤纸条上端固定在软木塞上，插入试管内，使窄条进入溶液中（色素点要略高于液面，滤纸条边缘不可碰到试管壁），盖紧软木塞，直立于阴暗处（或试管外套一黑纸套）。 ⑤经0.5-1h后，观察分离后色素带的分布。最上端橙黄色的是胡萝卜素，其次为叶黄素，于下面蓝绿色为叶绿素a