FISH杂交技术概要
Applications of FISH 基因组结构研究; 染色体精细结构变异分析; 病毒感染分析; 人类产前诊断; 肿瘤遗传学; 基因组结构研究 染色体精细结构变异分析 Viral Infections Prenatal Diagnosis 以21号染色体的相应片段序列作探针,与外周血中的淋巴细胞或羊水细胞进行原位杂交,可快速、准确进行诊断。 FISH技术新进展 随着FISH的广泛应用,FISH本身也得到长足进步。这主要表现在以下几个方面: 探针 由最初的每次杂交用一种探针发展为每次杂交用多种探针,即由单色荧光原位杂交发展为多色荧光原位杂交 标记物质 由单一的几种发展为现在的几十种 杂交步骤和过程 分别由20多步、15h缩减为不到10步、2h 荧光原位杂交的发展前景 FISH技术在遗传学研究中已经取得了不小的成绩,但是其深度与广度还不够,尤其与生产实践、经济效益的联系不够紧密。 随着标记手段、检测试剂、荧光观察等技术的发展,FISH 技术的应用范围在不断扩展,今后该技术在研究细胞核骨架与基因表达的关系,基因转录、重排、扩增,基因组结构与调控,哺乳动物的染色体进化研究及亲缘关系等领域将会起到积极的作用。 最常用的探针标记法是缺口平移法,其原理是:首先用适当浓度的DNA酶Ⅰ在探针DNA双链上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ的5’→3’的外切酶活性,切去带有5’磷酸的核苷酸;
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