2013-14级分子生物学考题与2014作业程序.doc

分子生物学 闭卷 一、名词解释8个×4 有机溶剂沉淀法 基因组（genome）：是一个细胞或一种生物体的整套遗传物质，包括基因和非编码DNA。即该生物体的一套染色体中的完整的DNA序列。 LC-MS 4、gene therapy［基因治疗］：（狭义）将具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。（广义）将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，最终达到治疗疾病的目的。 5、Real-time （荧光定量）PCR：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 6、基因诊断：即分子诊断，指通过分子生物学和分子遗传学技术，直接检测遗传物质结构和表达是否异常，从而对人体的健康状态和疾病做出诊断的方法。 7、分子标记物： 8、逆转录PCR P207 二、问答题8个：8，8，8，8，10，8，10 1、酵母双杂交技术的原理和应用？［13、14考题］P41 2、蛋白质分离纯化的基本原则？常用有哪些方法？ 3、基因诊断的方法哪些？杜氏肌营养不良（DMD)的基因诊断可采用什么方法？原理与步骤如何？P78 基因诊断的方法有：PCR；核酸杂交；基因芯片；bDNA；NASBA；测序。 杜氏肌营养不良（DMD)的诊断方法：多重PCR 4、pUC载体常用的筛选方法是什么?原理与步骤？［］ 5、寡核苷酸探针的设计原则？ 探针长度：一般要求在10～50bp。 G／C含量为40％～60％。 探针分子中应避免互补序列。 避免同一碱基连续出现，一般不能多于4个，如GGGG-或 -CCCC-。 借助计算机相应软件与已知的各种基因序列进行同源性比较。 6、Ct值的含义与作用。 意义：确定初始模板的浓度。初始 DNA量越多, 荧光达到某一值（域值）时所需要的循环数越少 Log浓度与循环数呈线性关系，根据样品扩增达到域值的循环数就可计算出样品中所含的模板量 7、阅读文献4原题。 8、骨髓干细胞的特点。 【1】名词解释[加灰为作业涉及的13年考题，加框为新增作业题] 1、生物大分子:具有较大的分子量，由简单的小分子（核苷酸或氨基酸）排列组成，蕴含丰富信息并且具有复杂的空间结构。 2、蛋白质组（proteome）：指由一个基因组，或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。 3、Probe：核酸探针：是指带有某些标记物（如放射性同位素、荧光物质等）的特异性核酸序列片段，可与互补片段结合成双链结构，从而检测互补链的位置。 4、基因芯片（gene chip）：又称DNA微阵列（microarray），是由大量DNA或寡核苷酸探针密集排列所形成的探针阵列，其工作的基本原理是通过杂交检测信息。 5、DNA-chip:DNA芯片。指通过微阵列技术将高密度DNA片断阵列通过高速机器人或原位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面作为探针，荧光标记的样品DNA/RNA借助碱基互补作用与探针进行杂交，从而进行大量的基因表达及检测等方面的研究。 6、SNP［单核苷酸多态性］：指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，是决定个体差异最主要的遗传物质。它是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上，与疾病的发生、药物的作用均相关。 7、有机溶剂沉淀法：是沉淀法的一种，不同溶解度的产生是由于溶质分子之间及溶质与溶剂分子之间亲和力的差异而引起的，溶解度的大小与溶质和溶剂的化学质及结构有关，溶剂组分的改变或加入某些沉淀剂以及改变溶液的pH值、离子强度和极都会使溶质的溶解度产生明显的改变。根据这种原理，有机溶剂多用于蛋白质和酶、多糖、核酸以及生物小分子的分离纯化。 8、气相色谱-质谱联用仪（GC-MS ）：是一种结合气相色谱和质谱的特性，在试样中鉴别不同物质的方法。GC：气相色谱的流动相为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。 MS：是一种测量离子荷质比（电荷-质量比）的分析方法，其基本原理 是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带正电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定其质量。 9、代谢组学：是研究一个细胞、组织或器官中所有小分子代谢组分集合的科学。代谢组学研究的目的是