白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程征求意见稿.doc

DB52 贵州省地方标准 DB 52/XXXXX—2016 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程 （Production Technique Regulations for Detoxification ube seedlings and Original seed of baishui ginger） 2016- XX– XX发布 2016 – XX -XX 实施 贵州省质量技术监督局 发布 目 次 前言 2 1 范围 3 2 规范性引用文件 3 3 术语和定义 3 3.1 机械损伤 3 3.2 脱毒试管苗培育 3 3.3 脱毒原原种 4 4 白水生姜脱毒试管苗培育 4 4.1 茎尖分生组织热处理 4 4.2 脱毒试管苗离体诱导 4 4.3 脱毒试管苗继代扩繁 5 4.4 脱毒试管苗生根培养 5 4.5 培养条件 5 5 白水生姜脱毒原原种繁育 5 5.1 移栽前炼苗 5 5.2 基质种类 6 5.3 大棚与基质消毒 6 5.4 脱毒试管苗适期移栽 6 5.5 移栽后成活期管理 6 5.6 肥水管理 6 5.7 病虫害防治 7 6 质量控制 7 7 适时收获与贮藏 7 前 言 本标准按照国标GB/T 1.1—2009《标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由安顺市农业科学院提出。 本标准由归口。 本标准主要起草人：吴家丽、牛力立、宋生懿、陈红艳、敖艳飞、张领、钟思玲、严云刚、宋贞富、郭海燕。 白水生姜脱毒试管苗及原原种生产技术规程 1 范围 本标准规定了白水生姜脱毒试管苗培育方法、脱毒原原种生产技术措施等。 本规程适用于生姜脱毒试管苗及原原种生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4285 农药安全使用标准 GB/T 8321（所有部分）农药合理使用准则 NY/T 404-2000 脱毒生姜种姜苗病毒检测技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1机械损伤（Mechanical damage） 整块姜或部分侧瓣，因刀伤、挤、压、擦、碰等外力造成的伤害。 3.2脱毒试管苗（Detoxification tube seedlings） 应用茎尖组织培养技术获得的再生试管苗，经检测确认不带烟草花叶病毒（TMV）、黄瓜花叶病毒（CMV）的试管苗。 3.3脱毒原原种（Detoxification original seed） 用脱毒苗在防虫在网室、温室条件下生产的符合质量标准的种姜。 4 白水生姜脱毒试管苗培育 4.1茎尖分生组织热处理 精选块大肉厚、皮色黄亮光滑、芽眼饱满、无病虫危害和机械损伤的健壮姜块在自来水下洗净泥土，用0.1％的高锰酸钾处理15min，再用0.5%多菌灵浸泡2h后捞出晾干，置于高温灭菌后的珍珠岩中进行恒温(28℃)催芽，相对湿度在80%～85%。待姜芽萌动后，于40℃～45℃（8h/d）高温下热处理一个月。 4.2脱毒试管苗离体诱导4.2.1外植体采集与消毒灭菌 于光照箱中切取热处理后长2cm左右的姜芽，在自来水下冲洗20 min～30 min后晾干，在超净工作台上用75%酒精处理30s，再用10%次氯酸钠（Naclo）对姜芽进行消毒处理15min，无菌水冲洗5次后置于无菌滤纸上，吸干水分备用。 4.2.2外植体接种 将灭菌后的姜芽置于体视镜下剥取0.1 mm～0.3 mm的茎尖分生组织，接种于以MS为基本培养基，添加6-BA 2.0mg/L、NAA 0.1mg/L的诱导分化培养基中进行试管苗再生植株诱导。 4.2.3再生试管苗脱毒检测 茎尖分生组织诱导获得的生姜试管苗须经有资质的检验单位进行烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒检测，确认无毒后，再进行继代扩繁及生根培养。 4.3脱毒试管苗继代扩繁 将检测无病毒、叶绿、长势好、无黄化的试管苗壮苗接种于MS+6-BA 2.5 mg/L～3.0 mg/L+NAA 0.03mg/L的增殖培养基中进行增殖培养，扩大试管苗繁育量。 4.4脱毒试管苗生根培养 在试管苗移栽前选取株高2 cm～3 cm、长势壮的试管苗再生植株接种于MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.5mg/L的生根培养基进行生根培养，以利于提高试管苗移栽成活率。 4.5培养条件 培养室温度为25℃～30℃，光照2000lx，12 h/d～16 h/d，培养基PH 5.8～6.0。 5白水生姜脱毒原原种繁育 5.1移栽前炼苗 试管苗移栽前一周将生根良好、生长健壮、株高4cm以上的脱毒试管苗连同培养