一个新的核蛋白基因控制梨孢菌的分生孢子形态与侵染结构的形成.pdfVIP

孢子产生能力。此外，作告还通过MagCONl的启动子与GFP的融合结构以及 Northern blot分析了MagCONl的表达动态，结果表明：该基因在分生孢子梗、 分生孢子，芽管以及附着胞中有表达，但在侵染菌丝中未观察到GFP表达。目 前，作者正在构建相关的基因结构，以解明MagCONl是否的确编码一个含有锌 指结构的转录因子。 _个新的核蛋白基因控制梨孢菌的分生孢子形态与侵染结构的形成 赵晓燕，彭友良 (中国农业大学植物病理系，北京100094) 梨孢菌(Magnaporthegrisea)引起水稻稻瘟病，该病是水稻最重要的病害 之一。梨孢菌也是研究植物病原真菌的模式系统之一，其致病性分子基础的探讨 不仅有助于梨孢菌和其它病原真菌的致病机理的解明，而且还有助于稻瘟病和其 它真菌病害的控制。 梨孢菌的分生孢子呈梨形，由三个细胞组成，是该菌侵染水稻的主要初侵染 源和再侵染源。但是，有关该菌分生孢子的形态建成及其在致病性中作用的研究 还十分缺乏。为此，作者开展了本研究。 首先，作者通过筛选从野生型菌株P131的REMI转化体库中获得了三个具 有相似分生孢子形态变异的突变体X54，H3035和1-13587。与该野生型菌株相比， 三个突变体均产生细长的分生孢子，并对水稻的致病力明显减弱。其中，X54的 致病力比H3035和H3587强。接种洋葱内表皮的结果表明：三个突变体致病力 的减弱主要是由于侵入频率的降低和侵染菌丝形成的减少所造成的。有性杂交证 明：三个突变体的突变表型与插入标记是共分离的。 然后，作者通过质粒拯救分离了三个突变体的质粒插入侧端序列。序列分析 发现：在三个突变体中，质粒插入破坏的是同一个基因；其中，H3035和H3587 中导致变异的插入处于同一个位点，该位点与X54中的位点相差2kb。基因预测 表明：一个10．5kb的SphI酶切片段能包括预测基因的全长，作者将该基因命名 为MgCOMl。用插入侧端序列为探针筛选基因组文库，获得了包含全长MgCOMl 的阳性克隆。功能互补和基因置换实验证明：MgCOMl是梨孢菌维持其分生孢 子梨形状态所必需的，同时也是影响附着胞侵入和侵染菌丝形成效率的重要基 因：该基因的破坏或表达受阻导致细长分生孢子、附着胞的侵入降低和侵染菌丝 形成能力减弱等缺陷，从而导致致病力显著减弱。 质，MGCOMl。该蛋白质在氨基酸序列上与所有已知功能蛋白几乎没有相似性， 属于一种全新的蛋白质；在一级结构上含有KAP重复和I／VRAPKEP重复等结 构域，KAP重复结构域在组蛋白1和一些转录因子中已被证明为DNA结合域， 含有一个功能性的核定位序列，定位于细胞核内。因此MGCOMl可能是一个转 录调控蛋白。非常有意思的是，9个已完成或正在进行全基因组核苷酸序列测定 terreus外，其它均具有 的子囊菌亚门的不整子囊菌和核茵类真菌，除Aspergillus MGCOMl类似物(全长蛋白质一致性高于25％)，而在已完成基因组测序的酵 母菌类和担子菌中未发现类似物，说明COMl类似物可能是丝状子囊菌，至少是 不整子囊菌和核茵类真菌的特异蛋白。这7种具有MGCOMl类似物的真菌均产 生分生孢子，其含有的MGCOMl类似物也均具有核定位信号，说明COMl蛋 白的重要生物学功能可能是控制分生孢子的形态建成。需要进一步研究的是在含 有MGCOMl类似物的其它病原真菌中，COMl类似物是否在致病性中也具有重 要作用。 此外，作者还通过Northern杂交和启动子分析证明：MgCOMl基因在分生 孢子、附着胞和侵染性菌丝中表达；翻译起始密码子上游800bp的核苷酸序列具 有完整的启动子活性；其中，控制分生孢子阶段特异表达的顺式元件位于翻译起 始密码子上游800bp至600bp之间。 本研究从梨孢菌中发现了一个全新的基因MgCOMl。该基因在子囊菌亚门 的不整子囊菌和核菌类真菌中广泛存在，可能控制着分生孢子的形态建成，同时 也可能是这类真菌中病原真菌的重要致病力基因。该基因的发现对于半知菌的系 统分类、环境友好新型杀菌剂的开发有重要指导意义。 一个HOMEO．域蛋白控制梨孢菌附着孢成熟 张凯，时涛，张裕君，彭友良 (中国农业大学植物病理学系农业部分子植物病理学重点开放实验室，北京100094)