一个新的潜在的肿瘤标志物TRA16在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义.pdfVIP

生物技术 一个新的潜在的肿瘤标志物TRAl6在非小细胞肺癌 组织中的表达及临床意义· 郑庆锋陈晋峰熊宏超孙潞季加孚杨跃 北京大学临床肿瘤学院，北京肿瘤医院外科，100036 摘要研究TRA．16(testicularnuclear associated orphan receptor-4 protein)在非小细胞肺癌组 织(NSCLC)中的表达特点，了解其与NSCLC临床病理、预后及肺癌细胞生物学特性的关 系．方法：制备TRA．16多克隆抗体，采用免疫组化的方法，以组织芯片的形式对168例， 包括不同肺癌病理类型、肺部良性病变和正常肺组织标本中TRA．16的表达状况进行检测， 并进行统计学分析。结果：TRA．16蛋白在正常肺组织、肺良性及恶性肿瘤组织中的表达明 显不同．在NSCLC胞浆及核内具有较强的阳性表达率(83．2％)，而在肺良性肿瘤及正常肺组 织中均无阳性表达．相关性分析显示TRA．16在NSCLC中表达的强弱程度与肿瘤的分化程 度具有相关性(P=0．0293)．预后分析中TRAl6与肺癌患者的预后无统计学意义．结论： TRA一16在肺癌组织中的异常表达，说明其．-q青g是一种潜在的肺癌肿瘤标志物；TRA．16与肺 癌组织分化程度的高度相关性，说明其可能在肺癌的发生过程中发挥一定的生物学作用． 关键词肿瘤学；TRA．16；NSCLC；免疫组织化学 肺癌是世界范围内威胁人类健康的恶性肿瘤。在我国，肺癌的发病率及死亡率同样逐年上升‘1‘2】。肺 癌发生过程中特异表达蛋白的研究对于阐述肺癌发生过程的生物学机制具有重要的作用，并有可能最终对 明与性激素相关的一些蛋白在肺癌的发生过程中可能具有一定的作用。性激素属于类固醇激素，其受体均 为核受体，这些核受体在基因转录调控过程中发挥重要的作用，其中TR4(睾丸孤核受体)是核受体超家族 的表达特点，及其临床病理意义，以初步了解TRAl6在肺癌发生过程中的作用。 l材料与方法 1．1材料 1．1．1标本收集 肺良性病变和2例正常肺组织作为对照。共168例标本，经有经验的病理医师根据WHO2004年的肺癌组织 病理分类标准及1997年第八届国际肺癌大会制定的分期标准进行分类和分级‘25,261：高分化、中分化、低分 化。入组的肺癌类型包括：鳞癌，腺癌(包括支气管肺泡细胞癌)，腺鳞癌，大细胞肺癌，多形性肉瘤样癌，类癌， 唾液腺型癌，肺良性病变病理类型包括：炎性假瘤，结核瘤，硬化性血管瘤和错构瘤。采用组织芯片机(Beecher ’基金项目：国家自然科学基金，北京市教委科研基金资助 151 中国科协第四届优秀博士生学术年会论文浆 InstrumentsUSA)将病理标本制成每点为0．6ram2的组织芯片∞I。 11．2主要试荆 免疫组织化学信号放丈试剂盒．选用EnVisonTM两步法兔鼠双标免疫组织化学染色试剂盒，购自 DAKO公司，其中包括DAB显色液。一抗稀释液购自DAKO公司AIlnbodyDiluent 1．2方法 1．2I组织芯片制作 复查组织切片，审查病理诊断．标记组织中的靶点 (即欲取组织点J，收集相应组织蜡块(供体腊块)，标记相 霹弼 应靶点。制作空白蜡块(RP受体蜡块)．用组织芯H制作机 (Betcher Instruments．USA)在受体蜡块上打洞．获取供 体蜡块组织芯．直接插^受体蜡块的空洞内。将制成的 组织芯片蜡块再放入蜡块制作模具，放入60℃烤箱内 I h，半融状态的石蜡在室温条件下冷却约30rain，再 放入--20℃冰箱内冷冻，切片备用(图1)。 誊薯童 -． 1 2．2抗IRAl6免疫血清制各 ■_“-■-t●………^～ 根据TRAl6(TR40砷hanl’J．eptor assoc