单昧中草药水煎剂对奶牛子宫内膜炎病原菌的药物敏感性试验.pdfVIP

笫27分会场整合生理学——从分子到整体 509 单昧中草药水煎剂对奶牛子宫内膜炎病原菌的药物敏感性试验① 赵红琼- 黄 燕2 简子键1 卢学忠3 王茂生3 1．新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐，830052； 2．四川省寄生虫研究所，成都，610041； 3．新疆阜康市兽医站，新疆阜康，831500 摘 要 本试验用纸片琼脂扩散法测定30种单味中草药水煎剂对患有子宫内膜炎的奶 牛子宫分泌物中分离的细菌：溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的敏 感性。结果显示大黄、连翘和金银花等相对其他单味中草药对分离细菌的平均抑菌圈直径较 大，所有受试单味中草药对大肠杆菌没有抑制作用。 关键词 兽医学 病原菌 中草药 药物敏感性试验 奶牛子宫内膜炎主要是由于子宫内膜被病原微生物感染而引起母牛繁殖障碍的一种常见病，该病 可导致母牛生殖机能紊乱，引发不孕症，使之生产性能降低，给养牛业造成巨大经济损失。在兽医临床 上对于奶牛子宫内膜炎的防治和治疗普遍采用的是抗菌药物和激素，由于有些药物使用后会在肉和奶 中残留或增加细菌的耐药性，因此原来使用的某些药物已经被禁止使用，国家和部门也制定了相应的兽 药使用规范。中草药是我国几千年来遗留下来的文化瑰宝，大多数具有毒性小，副作用少，成分复杂细 菌不易产生耐药性的特点。本试验的目的是测定单味中草药水煎剂对患有子宫内膜炎的奶牛子宫分泌 物中分离的细菌的抑菌圈直径，为筛选能够有效治疗奶牛子宫内膜炎的中药复方制剂提供理论依据。 一、材料和方法 1．仪器设备 流水式中药粉碎机(大德中药机械有限公司)、DFT一50手提式高速中药粉碎机(大德中药机械有 司)；SHZ—D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂)、磁力搅拌器、无菌操作台、培养皿。 2．单味中草药水煎剂的提取 金银花、当归、连翘、蒲公英、柴胡、北板蓝、鱼腥草、新疆紫草、红花、麻黄、益母草、大黄、黄芩、苦参、 陈皮、广藿香、桂枝、黄柏、莪术、蛇床子、地肤子、败酱草、马齿苋、蛇舌草、半支莲、射干、虎杖、瞿麦、川 芎、大青叶等30种中草药均从广州市医药公司选购的干品。各味中草药均采用水提的方法提取、过滤， 4C冰箱保存，备用。 3。中药药敏试纸的制备 用杭州天河微生物试剂有限公司赠送的标准空白药敏纸片，直径6．35mm，在无菌条件下每片精确 滴加20,uL单味中药原液，干燥后密封保存，备用。 ①项目来源：新疆科技厅。 5J0 以科学发展观促进科技创新(1、) 4．培养基 用MH(Mueller MHA，琼 链球菌药敏试验时，在MHA中加5％的兔脱纤血。用150mm内径平皿，每个平皿倾倒60mL 脂厚度4ram，可将13种中草药纸片同时贴于一个平皿，各纸片中心相距大于24mm。 5．接种的细菌 接种的细菌为从患有子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物中分离的细菌，主要有溶血性链球菌、金黄色葡萄 standard)。本试验用光径 球菌、大肠杆菌和蜡样芽孢杆菌。细菌接种量为0．5麦氏比浊标准(McFarland 菌为大肠杆菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923，每株分离菌批内做三个重复，取其均值。 6．测定抑菌圈直径的方法 采用世界卫生组织推荐，目前各实验室广泛采用的纸片琼脂扩散法(discdiffusion)，即Kirby— agar Bauer法。该方法的基本原理是将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种检验菌的琼脂平板上。纸片中 所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散，形成递减的浓度梯度。在纸片周 围抑菌浓度范围内检测菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映检测菌对测定药 物的敏感程度，并与该药的最小抑菌浓度呈负相关。抑菌圈直径(包含纸片的直径)用游标卡尺测量。 由于目前没有关于中草