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上转换发光技术研究报告 广州万孚生物技术股份有限公司 欢迎您走进万孚 上转换发光技术(up-converting phosphor technology, UPT):利用UCP颗粒(稀土离子)作为荧光材料,通过吸收较低能量的长波红外光, 发射高能量的短波可见光来实现能量上转换,此现象称反Stokes 效应。 UCP颗粒的上转换发光是“低能光激发、高能光发射”; 一般荧光颗粒是“高能光激发、低能光发射”的,也叫下转换发光。 技术背景 上转换发光的机制分为激发态吸收(excited state absorption, ESA)、能量转移(energy transfer, ET)和光子雪崩(photon avalanche, PA)三个过程,完成上转换发光过程大致需要六个步骤: APTE为光子添加能量转移过程, ESA为激发态吸收, COS 为合作敏化, COL 为合作发光过程, TPAE为双子光激发过程, PA 为光子雪崩过程。 2012,上转换荧光技术在食品安全检测中的应用 技术背景 UCP颗粒作为生物标记物在1995年便已引起了美国军方的重视,在国防部下属DARPA(Defense Advanced Research Projects Agency)的大力支持之下,开发了基于上转换发光技术的手持式传感器(UPT-based handheld sensor)以及流式细胞仪(Compact UPT-based flow cytometers),用于对战场上可能使用的多种生物战剂进行快速的预警与鉴定。 技术背景 中国科学院、军事医学科学院、北京热景生物技术有限公司等几家机构于2001年开始自主进行UPT系统研究,研制出纳米(10-20nm)尺度高发光效率UCP颗粒,突破了以亚微米(400nm)UCP颗粒作为标记物的传统思路,最终建立了从纳米UCP颗粒制备、纳米UCP颗粒修饰活化、纳米UPT免疫层析技术平台建立、UPT生物传感器研制在内的技术平台。 技术背景 上转换发光技术的不足 由于技术缺陷,国外(主要是美国)对上转换发光技术的研究已基本停止,国内的上转换发光技术的研究刚起步技术还不成熟。 由于上转换发光效率和上转换激光器件结构、稀土离子的掺杂方案和基质材料还是存在问题,导致结果不太稳定。 2007,稀土纳米上转换发光材料研究进展; 2007,上转换发光材料及发光效率研究及展望; 2011,上转发光国内外技术现状、发展趋势(网站资料) 上转换发光定量的PCT定量检测 (如:热景) 万孚飞测?PCT定量检测 稀土离子荧光颗粒和上转换发光存在技术问题, 技术不够成熟 标记抗体富集纯化:临床诊断更特异,更准确,技术成熟 标准曲线范围相对较窄,线性范围窄(只能测量到50ng/ml,0.01~50 ng/ml)及灵敏度不足 11点定标,线性范围宽(0.1~100ng/ml),灵敏度高(0.01ng/ml) 磷光颗粒与生物活性分子的交联较繁琐,发光效率低,稳定性差 纳米微粒共价交联:免疫反应更充分,更稳定 反应时间长(20分钟),用血量大(血清样本50ul) 反应时间短(15分钟),用血量小(血清样本30ul) 针对上转换发光PCT定量检测(如:热景)对比优势:技术成熟、灵敏度更高、线性范围宽和稳定性更强的特点 利用稀土离子吸收高能量的短波辐射,发出低能量长波辐射的Stokes 效应 * 1、激发态吸收:发光中心处于基态能级E1 上的离子吸收1个能量为Φ1 的光子跃迁至中间亚稳态E2 能级。如果光子的振动能量正好与E2 能级和更高激发态能级E3的能量间隔匹配,则E2能级上的该离子通过吸收该光子能量而跃迁至E3 能级形成双光子吸收。 2、能量转移:当足够多数量的离子被激发到中间态时, 2个物理上相当接近的激发态离子可以通过相互作用,其中的一个离子返回低能态,另一个离子则被激发至高能态,并产生辐射跃迁。 3、光子雪崩:第一步,能量供体(通常是Yb3+) 把能量传递给受体使之跃迁到E2;第二步,E2能级上的1个离子吸收该能量后被激发到E3 能级;第三步, E3能级与E1 能级发生CR(交叉驰豫,cross relaxation )过程,离子都被积累到E2能级上,使得E2能级上的粒子数像雪崩一样增加,因此称为“光子雪崩”过程。 * 利用稀土离子吸收高能量的短波辐射,发出低能量长波辐射的Stokes 效应 * 1、激发态吸收:发光中心处于基态能级E1 上的离子吸收1个能量为Φ1 的光子跃迁至中间亚稳态E2 能级。如果光子的振动能量正好与E2 能级和更高激发态能级E3的能量间隔匹配,则E2能级上的该离子通过吸收该光子能量而跃迁至E3 能级形成双光子吸收。 2、能量转移:当足够多数量的离子被激发到中间态时, 2个物理上相当接近的激发态
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