1.1微生物培养技术课件 中图版选修1 .pptVIP

答案：(1)碳源 氮源 (2)(高压蒸汽)灭菌 调pH (3)单个菌落 菌落数 (4)E (5)扩大培养 2.(2012·济南模拟)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道内，遇适宜条件开始萌发，生出芽管，同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满昆虫全身。请回答下面的问题： (1)从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→_____→性能测定。白僵菌的菌样应从_____采集。 (2)分离白僵菌菌种的培养基属于_____培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于_____营养物质。 (3)白僵菌纯培养常用的接种方法是_____和_____。 (4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行_____处理，利用高温可以使微生物的_____等物质发生变性。 【解析】(1)白僵菌寄生在昆虫体内，因此应从患病昆虫体内采集白僵菌，采集的步骤应包括采集菌样、富集培养、纯种分离、性能测定等环节，以保证采集到的纯种有既定的生物学功能。(2)分离特殊微生物应采用选择培养基，在配制白僵菌培养基时加入的蔗糖为白僵菌提供碳源。(3)微生物纯培养时常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法。(4)在微生物的培养与分离过程中，培养基和接种工具都要进行灭菌，操作者要进行消毒；灭菌是采用物理或化学方法使微生物的蛋白质和核酸变性，从而达到彻底杀死全部微生物的目的，消毒则采用较温和的方法，杀死微生物的部分个体。 * 第一章 微生物培养技术 微生物培养基 选择培养基 平板 培养基 原料称量、溶解→调节pH→分装、包扎→灭菌→倒平板 固体平板培养基配制过程 将溶化后的固体培养基基质倒入无菌培养皿，冷却凝固后制成的培养基 分类 能让特定的微生物生长，抑制其他微生物生长，从而将所需要的微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基 目的要明确、营养要协调、pH要适宜 配制原则 碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等 营养成分 根据微生物生长繁殖和代谢的需要，将各种营养物质混合在一起，配制成的适合微生物生存的营养基质 概念 内容 项 目 【高考警示钟】 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同 (1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。 (2)含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。 消毒与灭菌 杀死环境或物体内外所有的微生物 杀死环境或物体上的病原微生物和有害微生物的营养细胞 结 果 高温灭菌法 强烈的理化因素 灭菌 射线消毒法和化学药剂消毒法 相对温和的理化方法 消毒 常用的方法 条 件 项目 微生物的分离方法 1.平板划线法、稀释涂布平板法、稀释混合平板法 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其生长成单个的菌落，则这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)目的：分离由一个细菌繁殖而来的菌落。 (3)菌落判断的依据：形状、大小、边缘、隆起度、颜色等。 (4)平板划线法与稀释涂布平板法比较： 过程 工具 相同点 涂布器 接种环 不同点 稀释涂布平板法 平板划线法 项目 接种环灭菌 ↓ 试管口灭菌 ↓ 沾取混合菌液 ↓ 接种(连续划线和交叉划线) 制涂布器 ↓ 涂布器涂布培养液 ↓ 无菌滤纸覆盖 ①工具灭菌、酒精灯火焰旁操作 ②工具灭菌冷却后才可使用 (5)实例：从酒曲中分离酵母菌。 2.选择培养基分离法 (1)原理：使分离对象大量繁殖，抑制其他微生物的生长。 (2)适用范围：分离的微生物在混合样品中数量较少时。 (3)实例：分离分解纤维素的细菌。 微生物的数量测定 优点 操作步骤 间接计数法——稀释平板计数法 显微镜直接计数法 方法名称 制成悬液 ↓ 显微镜下计数 ↓ 计算出单位体积内的 微生物总数 配制均匀的系列稀释液 ↓ 使其均匀分布于培养基内 ↓ 统计培养基中出现的菌落数 ①所需设备简单 ②能观察到微生物的形态特征 ①能观察到菌落的特征 ②在含菌数较少的情况下也可完成 计算公式 缺点 间接计数法——稀释平板计数法 显微镜直接计数法 方法名称 难以计数微小的细菌 每克样品中菌数= 某稀释倍数的菌落平均数细菌培养时所用的稀释液体积 ×稀释倍数