荧光和磷光重点.pptVIP

* 3、荧光分析法的应用 方法 直接荧光法 被测物本身有荧光 被测物与试剂反应后 F与物质的 浓度成正比 荧光猝灭法 被测物使荧光熄灭 由荧光强度降低的强度来测定被测物的含量 间接荧光法 某些阴离子夺取金属络合物中金属 离子，而释放出能发荧光的配位体 催化荧光法 反应速度慢，荧光微弱，难测定 金属离子将加速反应进行 * 磷光分析法 1．如何获得较强的磷光 增加试样的刚性: 低温冷冻 固体磷光法： 吸附于固相载体（滤纸） 分子缔合物的形成： 加入表面活性剂等 重原子效应： 加入含重原子的物质，如银盐等 敏化磷光： 通过能量转移产生磷光 磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动能级 →基态， T1 → S0跃迁； 电子由S0进入T1的可能过程：（ S0 → T1禁阻跃迁） * 荧光计上配上磷光测量附件即可对磷光进行测量。 在有荧光发射的同时测量磷光 磷光分析仪器 应用 * 化学发光分析法 一、基本原理 A +B → C + D* D* → D + h? 某些化合物接受能量而被激发，从激发态返回基态时， 发射出一定波长的光 （1）能够发光的化合物大多为有机化合物，芳香族化合物 （2）发光反应多为氧化还原反应，激发能与反应能相当 ?E=170～300 kJ/mol；位于可见光区 （3）发光持续时间较长，反应持续进行 发光反应如果存在于生物体(萤火虫)中，称生物发光 * 化学发光效率 化学效率： 发光效率： 化学反应所决定 化学反应和环境因素 化学发光强度(单位时间发射的光量子数)： dc/dt是分析物参加反应的速率 * 若化学发光反应是一级动力学反应则 即发光总强度与被测物浓度成线性： 二、化学发光反应类型 1. 直接化学发光和间接化学发光 直接发光 是被测物作为反应物直接参加化学发光反应 ，生成电子激发态产物分子，此初始激发态能辐射光子 A + B? C* + D C* ? C + h? * 间接发光是被测物A或B，通过化学反应生成初始激发态产 物C* ， C* 不直接发光，而是将其能量转移给F，使F跃迁 回基态，产生发光。 A + B? C* + D C*+F? F* + E F* ? F + h? 2. 气相化学发光和液相化学发光 （1）气相化学发光 化学发光反应在气相中进行 主要有O3、NO、S的化学发光反应，可用于监测空气中的 O3、NO、SO2、H2S、CO、NO2等 NO + O3 → NO2* NO2* → NO2 + h? * （2）液相化学发光 化学发光反应在液相中进行 应用最多的发光试剂：鲁米诺（3-氨基苯二甲酰肼）； 鲁米诺在碱性溶液中与双氧水的反应过程： 鲁米诺- H2O2发光反应反应速度慢，可检测低至 10-9 mol/L 的H2O2； * 光谱分析法 原子光谱 原子吸收光谱 原子发射光谱 原子荧光 分子光谱 分子吸收 紫外可见光谱 红外光谱 分子发光 * 第二章 分子发光分析 分子 吸收能量 激发为激发态 释放出能量 基态 电能 化学能 光能 称为“发光” 光的形式释放 荧光 磷光 分子发光 光致发光 化学发光 辐射跃迁 非辐射跃迁 以热的形式释放 * 分子荧光分析法 一、基本原理 （一）荧光和磷光的产生 ? 从分子结构理论来讨论 分子中电子 的能量状态 电子所处的能级 振动能级 转动能级 电子的多重态 J=2S+1 S：为各电子自旋量子 数的代数和 S=0, J=1 单重态S表示 （所有电子都是自旋配对的） S=1, J=3 三重态 T表示 大多数基态分子都处于单重态 电子在跃迁过程中伴随着 自旋方向的变化（自旋平行） * 基态单重态S 激发态单重态S 激发态三重态T 激发单重态S与激发三重态T的不同点： ⑴ S是抗磁分子，T是顺磁分子 ⑵ tS = 10-8s, tT = 10-4～1s；(发光速度很慢) ⑶ 基态单重态到激发单重态的激发为允许跃迁， 基态单重态到激发三重态的激发为禁阻跃迁； ⑷ 激发三重态的能量较激发单重态的能量低 * 其中S0、S1和S2分别表示分子的基态、第一和第二电子激发的单重态 T1和T2则分别表示分子的第一和第二电子激发的三重态。 V=0、1、2、3、…表示基态和激发态的振动能级。  2．分子内的光物理过程 * S0 S1 S2 T1 吸光?1 吸光?2 振动弛豫: 在同一电子能级中，电子由高振动能级转至低振动能级，而将多余的能量以热