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酸性氧化电位水对大肠杆菌的灭菌影响因素研究 1 1 2* 1 唐文伟 ，欧阳婷 , 曾新平 ，倪亚明 (1. 同济大学化学系，上海 200092；2. 同济大学生命科学与技术学院，上海 200092；) 摘要：以大肠杆菌为灭菌对象，研究了酸性氧化电位水（EOW ）的灭菌效果和有效氯（ACC ）、pH 值、有 机干扰物的影响，并与次氯酸钠溶液进行比较。结果表明：EOW 对大肠杆菌具有高效、快速的杀菌能力， -1 ）的杀灭对数值（KL ） 并随ACC 增大而显著提高。在无干扰物、作用0.5min 时，EOW （ACC ：12.4mg·L 为 3.69，ACC 升至 33.1mg·L-1 时可完全灭菌。干扰物显著降低EOW 的杀菌能力，在含3%干扰物、作用 0.5min 时，EOW （ACC ：44.7 mg·L-1 ）的KL 只有0.33 。pH 值越低，EOW 灭菌效果越好，在无干扰物、 作用0.5min 时，pH 值从6.01 升至11.98，EOW （ACC ：74.2mg·L-1 ）的KL 从8.74 降至0.39 。未调pH 值 的NaClO 溶液灭菌能力远低于EOW ，低pH 值的H PO 、HCl 灭菌能力很弱，pH 值、ACC 相近的NaClO 3 4 溶液的灭菌能力和EOW 相近。稀释的EOW 灭菌效果依然良好，可以高浓度保存以节约制备成本。EOW 的高效杀菌能力是以ACC 为主导，低pH 值及高ORP 为重要促进的三者协同作用的结果。 关键词：酸性氧化电位水；大肠杆菌；灭菌效果；影响因素；NaClO 溶液 由病源微生物引发的传染性疾病严重危害人类的健康。据WHO 统计，每年约有 1700 万人死于微生物的感染，疯牛病、口蹄疫、炭疽病、SARS、禽流感等的肆虐给各国经济、 人民生命和国家安全成了巨大损失。利用化学消毒剂进行致病微生物的预防是最有效的抵御 手段，开发高效、无毒、方便、广谱的消毒剂成为消毒学领域的重要研究课题。 酸性氧化电位水（Electrolyzed oxidizing water ，EOW ）是电解NaCl 溶液的阳极出水， 其特点是低pH 值（≤2.7 ）、高氧化还原电位(ORP ≥1100mV）、含有一定浓度的有效氯（ACC ： -1 [1] -1 [2] 10~80mg·L ） 及活性氧（10~30 mg·L ） 。研究与实践表明，EOW 杀菌具有高效、安全、 无残留毒性等优点[3][4] 。目前关于EOW 灭菌的影响因素存在的四种学说（有效氯、活性氧、 低pH 值和高ORP 学说），都是围绕EOW 的理化性质中何者为主导杀菌因素来论证，关于 各影响因素的作用尚未达成共识。为此，本文以大肠杆菌为灭菌对象，研究了EOW 的灭菌 效果和有效氯（ACC ）、pH 值（ORP ）、有机干扰物的影响，并与次氯酸钠溶液进行比较， 以期阐明EOW 灭菌时影响因素的主次和各因素间的相互作用。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 电解槽：CTRO-60A 型电解水槽（上海某公司）；电源：STN- 电解控制器，直流电压调 节范围为0-250V （上海某公司）。主要试剂：氯化钠（分析纯），碘化钾（分析纯），硫代硫 酸钠（分析纯），氢氧化钠（分析纯），磷酸（分析纯），盐酸（分析纯）。 1.2 电解方法 以0.5～2.0g·L-1 的NaCl 溶液为电解液，在CTRO-60A 型电解水槽中进行动态电解，取 阳极出水（EOW ）做消毒剂。 1.3 理化性能测试 用雷磁PHS-3C 、PHS-3E 精密pH 计测定pH 值，用三信PHB-1 便携式pH/ORP 计测定 ORP ，用碘量法[5][6]测定有效氯浓度（ACC ），以Cl2 计。 1.4 细菌繁殖体液制备 大肠杆菌(ATCC 8099 ）购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。取24h 新鲜斜面培养 1 物，用稀释液（0.1%胰蛋白胨生理盐水）洗下斜面菌苔，将其稀释配制成菌悬液。 1.5