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微柱凝胶免疫检测技术概述 1990年，法国人Y. Lapierre发表文章介绍了一项免疫学检测新技术： 将抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合，即微柱凝胶免疫实验。 * Lapierre Y,Rigal D,Adam J, et al.The gel test:a new way to detected cell antigen-antibody reactions[J].Transfusion,1990;30(2):109-113. 血型检测篇 1990年，法国人Y. Lapierre发表文章介绍了一项免疫学检测新技术： 将抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合，即微柱凝胶免疫实验。 * Lapierre Y,Rigal D,Adam J, et al.The gel test:a new way to detected cell antigen-antibody reactions[J].Transfusion,1990;30(2):109-113. 反应原理 微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）。将微柱凝胶分子排阻层析原理应用于血型血清学检测。 在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。 4+ 2+ -  二.结果判定 阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。 阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。 反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。 4+ 3+ 2+ 1+ ± - 完全溶血 不完全溶血 混合凝集 微柱凝胶免疫检测技术优势 盐水 酶 抗人球蛋白法 简单 准确 敏感性高 易标准化 标本用量少 结果保存时间长 安全 聚凝胺法 专用机器 1.专用血型血清学离心机 用于检测卡的固定时间离心，固定参数，一键式操作，智能报警，简单方便，可容纳12张卡。 2.专用血型血清学孵育器 用于抗人球蛋白实验37℃孵育，采用空气孵育技术，操作简单，智能计时和报警，可容纳24张卡。 一.准备工作 检测卡的准备 1.外观检查。 2.将检测卡平衡至室温。 3.离心2-3分钟，均衡反应介质。 离心！ 检测标本的采集 用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，将同一人血液分别制备成红细胞标本和血浆标本。 血浆标本的制备 将抗凝血离心（3000rpm 3min或3500rpm 2min），取上清。该上清不得有絮状物或颗粒。 红细胞标本的制备 用红细胞稀释液配置成0.8%红细胞悬液。 配套试剂准备 如反定型细胞、筛检细胞等按要求配置成所需浓度，并放置一段时间至室温。 1、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）——用于血型定型  配套试剂 一卡一人份，操作简单，结果清晰、准确，尤其对弱抗原和亚型的检测有传统的方法无法比拟的敏感性，成为临床血型检测的常规方法。 1、ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）——用于血型定型  操作步骤： 1）将准备好的检测卡做好标记； 2）将待检者0.8%红细胞悬液分别加入1-4管中，各50μl； 3）将待检者血浆分别加入5-6管中，各50μl； 4）取0.8%的ABO血型反定型红细胞试剂，分别加入5-6管中，各50μl； 5）离心5分钟（900rpm2分钟，1500rpm3分钟）； 6）结果判读。 1、不规则抗体筛检卡—— 用于不规则抗体筛检  配套试剂 一卡两人份，配套使用的筛检细胞包含多个血型系统的抗原，可以检出更多的临床有意义抗体，尤其对配血不合的原因查找有重要意义,也为受检者体内不规则抗体的进一步鉴定提供了检测范围。 1.HDN母体IgG抗体效价检测卡——用于孕期母体IgG抗体效价检测 操作步骤 1）在试管中分别加入200μl母体血清和200μl 2-Me，将试管口封闭，然后置于37℃水浴30-60分钟。以充分破坏血清中IgM类抗体，同时用标准血清做对照。 2）取6只干净试管，分别做好标记。将处理后的血清做倍比稀释； 3）将准备好的检测卡做好