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植物学及植物生理学教研室 王连翠 一、植物组织培养的概念 植物组织培养(Plant tissue culture):指在无菌和在人工控制下,将离体植物的器官、组织、细胞以及原生质体培养在人工配制的无菌培养基上,在适宜的培养条件(营养、光照、温度)下,使其继续分裂、分化和发育的技术。 植物离体培养(Plant in vitro culture) 试管培养(In test-tube culture) 2.激素(植物生长调节剂)调控 图式 (1) 愈伤组织培养 (2) 器官培养 (3) 胚培养 (4) 细胞和原生质体培养 五、组织培养的应用 挽救濒临灭绝的植物 快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物 利用植物组织培养的材料作为植物生物反应器 植物组织培养结合超低温保存技术经济有效地保存植物种质资源 用于遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、生物工程等的研究 复习题 1、植物无糖组培的概念及意义? 《植物无糖组培快繁工厂化生产技术》 CO2 * A Glimpse of Plant Tissue Culture 第一章 绪论 第二章 基本技术与设施 第三章 培养基 第四章 愈伤组织 第五章 器官培养 第六章 植物脱毒技术 第七章 细胞培养与原生质体培养 植物组织培养 本课程学习目标 掌握基本原理 掌握基本概念 了解开展组织培养工作的基本设施 掌握植物组织培养基本的操作技术 掌握植物组织培养在植物快繁脱毒等方面的应用 概念 类型 形成与发展 应用 原理 第一章 植物组织培养的基础知识 二、组织培养的原理 1.细胞全能性学说 植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组,并具有发育成为完整植株的潜在能力。 全能性只是一种可能性。要把这种可能性变为现实性必须满足两个条件: 一:离体的条件下。 二:要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。 全能性体现的两个过程 脱分化过程 再分化过程。 再分化的过程有两种方式: 器官发生方式 胚胎发生方式 (1)生长素 用于诱导愈伤组织的形成,体细胞胚的产生以及试管苗的生根,更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽和不定芽的产生。 常用的生长素:2,4—二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸 (NAA)、吲哚乙酸(IAA)和吲哚丁酸(IBA)等。 作用强弱顺序:2,4-D>NAA>IBA>IAA。 (2)细胞分裂素 促进细胞分裂与分化,延迟组织衰老,增强蛋白质合成,促进侧芽生长及显著改变其他激素作用的特点。 常见的细胞分裂素有:2—异戊烯腺嘌呤(2-iP)、玉米素(ZT)、6—苄基氨基腺嘌呤(6-BA)、激动素 (KT)、苯基噻二唑基脲(TDZ) 。 作用强弱顺序: TDZ > 2—ip>ZT>6—BA>KT。 (3) 赤霉素 在植物组织培养中应用的仅有GA3一种,它是一种天然产物,能促进已分化芽的伸长生长。 其他植物生长调节剂:如脱落酸(ABA)、乙烯利(CEDP)等在植物组织培养中也有一定的应用。 注:生长素/细胞分裂素的比值: 大时有利于根的形成,这时生长素起主导作用; 比值小时,则促进芽的形成,这时细胞分裂素起主导作用。 外植体 愈伤组织 器官或胚胎 完整植株 脱分化 再分化 脱分化 再分化 三、组织培养的类型 植物培养 胚胎培养 器官培养 愈伤组织培养 组织培养 细胞培养 原生质体培养 培养材料 培养方式 固体培养 液体培养 震荡培养 旋转培养 静置培养 纸桥培养 将外植体接种在培养基上,由于植物生长调节剂的存在,其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。 愈伤组织是一种最常见的培养形式,因为除茎尖分生组织和一部分器官以外,其他的几种培养形式最终也都要经过愈伤组织才能再生植株。 愈伤组织的形态发生途径 : ①胚胎发生途径 ②器官发生途径 器官培养是通过培养器官的类别来分类的。培养的是什么器官,就称为什么培养。如根、茎、叶、花、果实、种子的培养。 胚培养是器官培养的一种。 选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。 其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养,由于胚包含在胚珠和子房里,因而进行胚胎培养时,常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。 胚培养用途: 1.拯救胚。 2.研究胚的发育营养研究。 3.一些特殊的领域的研究。 英国批准在实验室培养人和动物混合胚胎用于研究 细胞培养:将植物的单个细胞或细胞团分离出来,放在培养基上进行培养。 原
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