薄层色谱方法总结详解.ppt

第1章绪论 第1章绪论 薄层色谱方法总结 1.方法原理 A. 流动相利用毛细管力带着样品穿过固定相。 B.样品与固定相的相互作用是指组份在移行过程中由于偶极 - （诱导） - 偶极相互作用，氢键和范德华力的作用而产生不同程度的延缓、吸附、分散、离子交换和络合等分离机理。 2.溶剂 使用的溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯”，溶剂组成采用体积量比（如正丁醇 - 冰乙酸 - 水= 4：1：1，V/V/V），或者绝对量（如18ml 甲苯 + 2 ml 甲醇）。其总量应足以使TLC/HPTLC 板的浸入深度约为5mm。展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用，如需分层，则按要求放置分层后取需要的一相（上层或下层），备用。 一、溶剂选择规则 考虑分离成分的极性、溶解度、吸附度 根据相似相溶原则，注意，极性相差大的不混溶 混合溶剂通常使用一个高极性和低极性溶剂组成的混合溶剂 先加入极性较小的溶剂，若不溶再加入少量极性大的溶剂 一般把两种溶剂混合时，采用高极性/低 极性的体积比为1/3的混合溶剂，如果有分 开的迹象，再调整比例（或者加入第三种 溶剂），达到最佳效果；如果没有分开 的迹象（斑点较“拖”），最好是换溶剂。 展开剂的比例要靠尝试 二、展开剂的选择条件 1.对所需成分有良好的溶解性 2.可使成分间分开 3.待测组分的Rf在0.2-0.8之间，定量测定在0.3-0.5之间 4.不与待测组分或吸附剂发生化学反应 5.沸点适中，黏度较小 6.展开后组分斑点圆且集中 7.混合溶剂最好用新鲜配制 三、溶剂极性参数表 环已烷 :-0.2、石油醚（Ⅰ类，30~60℃）、石油醚（Ⅱ类，60~90℃）、正已烷:0.0、甲苯:2.4、二甲苯:2.5、苯:2.7、二氯甲烷:3.1、异丙醇:3.9、正丁醇:3.9、四氢呋喃:4.0、氯仿:4.1、乙醇:4.3、乙酸乙酯:4.4、甲醇:5.1、丙酮:5.1、乙腈:5.8、乙酸:6.0、水:10.2 1. 一般说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，再根据需要加入甲醇、乙醇、乙酸乙酯来调节系统的极性，以达到好的分离效果，适合于生物碱、黄酮和萜类等的分离。 2. 中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成，由甲醇、乙醇、乙酸乙酯等来调节，适合蒽醌、香豆素，以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离。 3. 强极性溶剂，由正丁醇和水组成，也靠甲醇、乙醇、乙酸乙酯等来调节，适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。 四、展开剂的选择 物质分子化学结构中，通常由较极性部分和非极性部分两部分。例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增加，展开剂极性也增加了。 1.类极性较小的挥发性物质 冰片：石油醚(30～60℃)—醋酸乙酯(17:3) 厚朴酚：苯－醋酸乙酯(9:1.5) 丹皮酚：环己烷－醋酸乙酯(3:1) α-香附酮：苯－醋酯乙酯－冰醋酸(92:5:5) 结论：以石油醚、正构烷和苯为体积百分数比较大的溶剂，通常起溶解和分离化合物的作用，而用醋酸乙酯为调节Rf（比移值）的溶剂。为了减少拖尾之类其他相似相溶原则以外的影响，适当加入添加剂，如有机酸或者有机碱。 2.类极性较小的不挥发性物质 β -谷甾醇：环己烷－醋酸乙酯－甲醇(6:2.5:1)或者环己 烷－丙酮(5:2)、 熊果酸：甲苯－醋酸乙酯－冰醋酸(12:4:0.5)、 齐墩果酸：氯仿－甲醇(40:1)、 猪去氧胆酸：氯仿－乙醚－冰醋酸(2:2:1)、 大黄素：苯—醋酸乙酯—甲醇(15:2:0.2)或者苯—乙醇(8:1)、 丹参酮ⅡA：苯-醋酸乙酯-甲酸(40:25:4)、 穿心莲内酯：氯仿-无水乙醇(9:1) 靛玉红、靛蓝氯仿－乙醇(9:1)或者苯－氯仿－丙酮(5:4:1) 结论：这类物质展开剂极性比极性较小的挥发性物质洗脱力强一些，因为这类物质极性小的母核大，而极性大的基团通常可以形成氢键，比如羧酸、羟基。以上物质，母核分子量减小、母核结构中不饱和健的增加（尤其是出现苯环），极性基团的增加，都使极性增加，展开剂极性也增大。。这个范围内的物质很多，一般展开剂大百分数的溶剂可以从环己烷—〉甲苯—〉二甲苯—〉苯—〉氯仿的顺序，按照极性要求选择。这里注意，异丙醇、正丁醇极性指数也比较小，在这范围的化合物很少用，因为粘性大、展开慢，造成斑点扩散；另外，羟基的氢键作用力也有不利。调节Rf值的溶剂，从醋酸乙酯—〉甲醇—〉丙酮—〉乙醇。挥发性物质也有很多带羰基、羟基的，但从它的挥发性就可以明白，分子间作用力不强，另外，母核与石油醚、正构烷和苯的结构差异小，估计更容易脱离硅胶吸附，更快进入溶剂中，而不需要通过提高展开剂的极性。 3.类极性大的小分子有机酸 结论：这类物质多数是苯乙烯母核的，这个结构的极性本