药学微生物项目三镜检技术2详解.ppt

二、打开电源、放片 C 1-2滴香柏油 D 过多会溢出弄脏载物台 E 损坏镜头 A 电源和光源是同一个键 B 放片时避免手指接触中央染色处 三、观察 粗调时注意调整手势，不要碰到微调旋钮 调到最高处不要继续旋转、易毁坏镜头、且香柏油进入镜头内太多难以清洗 缓慢旋转 注意事项 用油镜观察后，取下玻片时，应先使物镜离开油镜后再取出。 可用推进器前后左右调整观察对象位置。 * * * * * * 镜检技术 ——光学显微镜 一、显微镜 显微镜 光学显微镜： 可见光作为光源 电子显微镜：电子束作为光源 显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。根据光源不同，显微镜分光学显微镜和电子显微镜 暗视野显微镜 相位差显微镜 视频显微镜 荧光显微镜 体式显微镜 倒置显微镜等 投射电子显微镜 扫描电子显微镜 放大及分辨本领高于光学显微镜 伽利略改良了詹森父子的显微镜 英国科学家胡克自制显微镜观察细小物体，1665年出版《显微图谱》 引入“细胞” 第一架显微镜是荷兰眼镜工匠詹森父子在1590年前后制成的 显微镜发展过程 1878年 德国物理学家阿贝现代光学显微镜，放大2000倍左右 20世纪30年代第一架电子显微镜放大200万倍左右。 一、光学显微镜构造 显微镜 机械部分 光学部分 目镜 物镜 聚光器 反光镜 镜臂 镜筒 转换器 调节器 载物台 镜座 光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息的光学仪器。 1 2 3 4 5 6 7 8 10 11 12 9 1、目镜 2、粗准焦螺旋 3、细准焦螺旋 4、镜臂 5、物镜 6、镜柱 7、镜座 8、镜筒 9、压片夹 10、载物台 11、遮光器 12、反光镜 显微镜的光学系统 光学系统 物镜 目镜 聚光器 光阑 放大微小的物体或微细的结构，形成倒立实像 把像投射到目镜光阑处 放大物镜映来的已放大的倒立实像 校正物镜余留下来的像差 将物像投射到一定的位置上，便于放映或照相 使来自光源的光线放大，聚成光束，透过载片照明样品，射入物镜 显微镜的光学系统---物镜 显微镜的质量主要取决于物镜/价格昂贵 物镜的种类 根据前透镜与盖玻片之间介质的不同 干燥系物镜 水浸系物镜 油浸系物镜 物镜与盖片之间不加任何液体 4?，10 ? ，20? ，40? 水浸物镜刻有“W”或“Water”字样 水浸两用物镜刻有“Oil+w”字样 油浸物镜刻有“oil 或oel或 imm”和“HI”字样 甘油浸物镜刻有“Glyc” 或 Glyz”字样 物镜镜头 低倍镜 1 一般放大倍数为10倍，空气做光学介质 高倍镜 2 一般放大倍数为100倍，空气做光学介质 油镜 3 香柏油做光学介质，放大倍数最大 物镜上数字和符号意义（P25） S40：S--弹簧物镜；40：放大倍数。40倍100倍等高倍物镜工作距离小，成像时离物体表面近，都做成弹簧物镜。 A.0.65或N.A.1.65：物镜数值孔径，孔径越大分辨率越强。 160：镜筒机械长度（mm）。 0.17：所用盖玻片最大厚度（mm）。 目镜 1.目镜： 直插式：长度和放大倍数成 。 2.物镜： 螺旋式：长度和放大倍数成 。 特别说明：放大倍数和物镜与盖玻片之间的距离成 。 反比 正比 反比 目镜与物镜的比较 镜头 镜头长短 视野亮度 物像大小 细胞数 目 镜 低 倍 高 倍 物 镜 低 倍 高 倍 长 亮 小 多 短 暗 大 少 短 亮 小 多 长 暗 大 少 如图6-4中①、②表示物镜长度，③、④表示目镜长度，⑤、⑥表示物镜与玻片的距离，获得最大物像时正确的组合为( ) A、①③⑤ B、②④⑥ C、①④⑥ D、②③⑤ D 二、工作原理 人眼：0.2mm 光学显微镜：0.2um 电子显微镜：0.2nm 2.工作原理 折射和折射率 A 凸透镜的五种成象规律 B 显微镜的成像原理 C 油镜工作原理 D 2.1凸透镜的五种成象规律 当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象； 当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象； 当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象； 当物体位于透镜物方焦点上时，则象方不能成象； 当物体位于透镜物方焦点以内时，则象方也无象的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。 2.2油镜工作原理 显微镜使用时加入香柏油充填镜头和标本之间孔隙，香柏油折射率为1.51，大于空气折射1.0，因此使通过折射损失的光线减少，视野明亮，便于观察。