荧光偏振分析方法详解.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * Chem. Commun. 2011, 47, 4763-4765. 核酸酶检测及药物筛选 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Biosensors and Bioelectronics, 2013, 41, 569-575. 基于链置换反应开发的纳米金颗粒增强荧光偏振探针 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 J. Mater. Chem. B, 2013, 1, 2018-2021. T4 polynucleotide kinase activity and inhibition §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Asian J. 2014, 9, 2755-2760. 聚乙烯纳米颗粒增强荧光偏振信号放大分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 金纳米颗粒、硅纳米颗粒等虽然能有效增强荧光偏振值，但是探针与纳米颗粒需要复杂的共价连接； 开发一种普适、简单的荧光偏振增强剂仍然是一个重要的任务。 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 纳米材料的生物功能化方法 非共价功能化途径 静电相互作用 π-π堆积作用 范德华力 碳基纳米材料：石墨烯，碳纳米管，碳纳米颗粒等 ssDNA/dsDNA与碳基纳米材料之间的相互作用差别悬殊 与DNA发生π-π堆积作用 与多肽发生π-π静电作用等 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Commun. 2013, 49, 1942-1944. 氧化石墨烯增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 “signal-off” “signal-on” Anal. Chem. 2013, 85, 1424-1430. 氧化石墨烯增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Materials Science and Engineering C 2014, 38, 206-211. 碳纳米颗粒增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Biosensors and Bioelectronics, 2014, 54, 285-291. 碳纳米管增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Asian J. 2014, 9, 87-92. 碳纳米管增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 纳米球形聚电解质刷增强荧光偏振信号分析方法 ChemBioChem 2010, 11, 494-497. §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Acta Chim. Sinica 2013, 71, 1620-1624. 二氧化钛纳米棒增强荧光偏振信号分析方法 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第6章 荧光偏振分析方法 传统荧光偏振技术及发展情况概述 1 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 2 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 光的偏振性 非偏振光原理图 偏振光原理图 自然光在各个方向振动是均匀分布的 一束光线都在同一方向上振动 荧光偏振 （Fluorescence Polarization，FP） Polarized excitation 100% 0% 100% 0% 1926年Perrin首次在研究论文中描述他所观察到的荧光偏振现象。 如果被激发的荧光物质处于静止状态，该物质仍将保持原有激发光的偏振性； 如果被激发的荧光物质处于运动状态，该物质发出的偏振光将区别于原有激发光的偏振特性，也就是所谓的荧光去偏振现象。 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 如何衡量：偏振值的定义 P = - + 偏振值一般以mP（毫偏）来表示 r = - + 2 对于完全偏振发射，P = r = 1；对于自然光，P = r = 0 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 偏振值的影响参数 偏振值衡量荧光分子的运动性 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 分子的偏振性与分子旋转弛豫时间成比例，分子旋转弛豫时间是分子转过68.5度角时所用的时间； 分子旋转弛豫时间与介质黏度、绝对温度、分子体积和分子重量和气体常数有关。 20世纪50年代Weber进一步拓展了荧光偏振理论并首次将荧光偏振用于生化分析领域。 20世纪80年代，随着荧光探针和荧光偏振分析仪器商业化，荧光偏振技术在生命科学等各个领域扮演越来越重要的角色。 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 荧光偏振分析的一般步骤 利用荧光偏振的原理