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色谱法概论 容蓉 课件下载： jhq@sdutcm.edu.cn 405405 第一节 概述 一、色谱法(Chromatography)的发展 一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和萃取 现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。 迄今为止，色谱方法是最为有效的分离手段！ 其应用涉及每个科学领域。 历史： 1903年，俄国植物学家 Mikhail Tswett 最先发明。 植物色素分离见图示 色谱法的发展历史 年代 发明者 发明的色谱方法或重要应用 1906 Tswett 用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念。 1931 Kuhn, Lederer 用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重视。 1938 Izmailov, Shraiber 最先使用薄层色谱法。 1938 Taylor, Uray 用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。 1941 Martin, Synge 提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色谱）。 1944 Consden等 发明了纸色谱。 1949 Macllean 在氧化铝中加入淀粉黏合剂制作薄层板使薄层色谱进入实用阶段。 1952 Martin, James 从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。 1956 Van Deemter等 提出色谱速率理论，并应用于气相色谱。 1957 　 基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。 1958 Golay 发明毛细管柱气相色谱。 1959 Porath, Flodin 发表凝胶过滤色谱的报告。 1964 Moore 发明凝胶渗透色谱。 1965 Giddings 发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。 1975 Small 发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型离子色谱法。 1981 Jorgenson等 创立了毛细管电泳法。 早期的色谱技术只是一种分离技术而已，与萃取、蒸馏等分离技术不同的是其分离效率高得多。当这种高效的分离技术与各种灵敏的检测技术结合在一起后，才使得色谱技术成为最重要的一种分析方法，几乎可以分析所有已知物质，在所有学科领域都得到了广泛的应用。 色谱法起过关键作用的诺贝尔奖研究工作 　 年代 获奖学科 获奖研究工作 1937 化学 类胡萝卜素化学，维生素A和B 1938 化学 类胡萝卜素化学 1939 化学 聚甲烯和高萜烯化学 1950 生理学、医学 性激素化学及其分离、肾皮素化学及其分离 1951 化学 超铀元素的发现 1955 化学 脑下腺激素的研究和第一次合成聚肽激素 1958 化学 胰岛素的结构 1961 化学 光合作用时发生的化学反应的确认 1970 生理学、医学 关于神经元触处迁移物质的研究 1970 化学 糖核苷酸的发现及其在生物合成碳水化合物中的作用 1972 化学 核糖核酸化学酶结构的研究 1972 生理学、医学 抗体结构的研究 方 法 项 目 数 量 1985年版 1990年版 1995年版 2000年版 2005年版 HPLC 鉴别及含测 7 81 191 697 1327 TLC 鉴别及含测 1568 GC 鉴别及含测 47 高效液相色谱的样品 芬达橙汁汽水 水 甜味剂 人工香精(香橙) 人工色素(柠檬黄) 高效液相色谱 - 组分分离 芬达样品 色谱图 水 甜味剂 人工香精 (香橙) 人工色素 (柠檬黄) 高效液相系统 检测器 硅胶填料 液体医药样品 结果 高效液相色谱柱 可更换卡套 色谱柱 Agilent 1100 高效液相系统 溶剂 以不同速率 流出的组分 色谱图 高效液相系统和色谱柱 气相-质谱系统 色谱柱 气相色谱系统 生命科学 气相色谱分析实例 体液和组织中的药品 血醇水平 药品纯度 色谱分析领域(1) 食品与香料 分析实例 食品中的天然香精香料 人工香精香料 饮料中的醇类 样品: 比萨 色谱分析领域(2) 石化 DB-1, 15 m x 0.25 mm I.D. 0.25 μm film Stegosaurus-o-gram 分析实例 燃料油定级 汽车排放的废气 色谱分析领域(3) Nam Laket in Tibat 纳木错 PFCs Liver 180~680ng/g Blood 26~52 ng/g Plasma 2580 ng/ml PFCs 二、色谱法的几个重要术语* 1. 色谱柱（column） 在茨威特实验中,装有CaCO3的玻璃管,即是一根色谱柱(是指包括CaCO3的管). 2. 固定相 (stationary ph