色谱分析-基本原理分解.ppt

色谱分析法 色谱分析法基本原理 平衡理论 塔板理论 速率理论 分离度 混合物中各组分能否被保留或直接流出，以及各组分流出峰之间距离的大小与它们在两相中的分配系数有关。 分配系数与组分、固定相和流动相三者的分子结构、性质直接相关 分配过程的热力学-----分配系数----选择性和色谱定性 峰宽 峰的形状和面积----色谱定量 色谱峰的峰形和区域宽度与组分在固定相和流动相中的扩散、运输速率、柱外效应等有关。 色谱过程的动力学----色谱方法的选择和峰形预测 一、平衡理论 分配系数 分配比 分配等温线 影响色谱峰峰形的因素 分配 假设极小一段的色谱柱，在一定温度、压力下，在该一小段柱内发生的溶解-挥发或吸附-解吸得过程称为分配过程。 1、分配系数(K) 在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值。 分配系数K小的组分先出柱，K大的后出柱 K与温度有关，与两相体积、柱管特性和所用仪器无关。 固定相不变的情况下，K与温度呈反比。一定温度下，组分的分配系数 K 越大，出峰越慢。 分配系数(K) 每个组分在各种固定相上的分配系数K不同；选择适宜的固定相可改善分离效果。 气相色谱中，柱温是一个很重要的操作参数，对分离度影响大 液相色谱中，温度对分离度的影响小 在一定温度和压力下，组分在两相间分配达到平衡时，在固定相和流动相中的质量比，称为分配比。 它反映了组分在柱中的迁移速率。又称保留因子。也叫容量因子或容量比。 2、分配比(k) ? = Vm/Vs, 称为相比率，是反映色谱柱柱型特点的参数。对填充柱，? = 6~35；对毛细管柱， ? = 60~600。 K只决定于组分和两相性质，与体积无关。 k不仅与组分和两相性质有关，与相比有关，即与固定相的量有关。 K 与 k 的关系： K是浓度比只决定于组分、流动相、固定相性质及温度，与Vs和Vm无关。 K是在两相中的分配总量比（质量比）不仅与组分和两相性质及温度有关，与相比有关，即与Vs和Vm有关。 对于给定色谱，分离度由两相中样品的相对量决定，k为衡量保留能力的重要参数 K 与 k 的关系： 分配比 k 的求算： k也等于组分的校正保留时间与死时间的比值 k可通过实验测得。 k可表示出组分在柱中停留时间的长短。k越大，保留时间也就越长。 选择因子? ： A为先流出的组分，B 为后流出的组分。 K 或 k 反映的是某一组分在两相间的分配；而选择因子 ? 是反映两组分间的分离情况。 两组分 K 或 k 相差越大时，? 越大，分离得越好。 两组分在两相间的分配系数不同，是色谱分离的先决条件。 分配等温线 描述柱内气液平衡状态下，组分分子在两相中分配的行为 影响峰形的因素是分配等温线的非线性 凹形---拖尾 凸形---前沿 二、塔板理论 塔板理论是描述色谱柱中组分在两相间的分配状况及评价色谱柱的分离效能的一种半经验式的理论。 塔板理论将一根色谱柱当作一个由许多塔板组成的精馏塔，即将连续的色谱过程看作是许多小段平衡过程的重复。 塔板的概念是从精馏中借用的，成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布。 塔板理论假定： 1）每个塔板由气相和固定相组成。 2）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H； 3）塔板之间相互连接但彼此独立，不相互作用； 4）塔板之间无分子扩散； 5）组分在所有塔板上的分配系数相同； 6）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入(脉冲式)。 (一）、塔板理论概念 塔板理论是把色谱柱假想为一个精馏塔，塔内存在许多塔板，组分在每个塔板的气相和液相间进行分配，达成一次分配平衡。 随着流动相按一个塔板、一个塔板的方式向前移动。经过多次分配平衡后，分配系数小的组分，先离开蒸馏塔（色谱柱），分配系数大的组分后离开蒸馏塔（色谱柱），从而使分配系数不同的组分彼此得到分离。 设色谱柱由5块塔板（n=5，n为柱子的塔板数）组成 并以 r 表示塔板编号． r = 0，1，2，3，4，5；某组分的分配比 k=1。 根据上述假定．在色谱分离过程中。该组分的分布可计算如下 板号r 载气体积 0 1 2 3 进样 mM 0.5 mS 0.5 △△V mM 0.25 0.25 mS 0.25 0.25 2△V mM 0.125 0.125+0.125 0.125 mS 0.125 0.125+0.125 0.125 3△V mM 0.063 0.063+0.125 0.063+0.125 0.063 mS 0.063 0.063+0.125 0.063+0.125 0.063 按上述分配过程，对于n=5