血液RNA提取试剂盒血液RNA提取试剂盒.docVIP

 PAGE - 4 - PAGE - 4 -    ◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外◆ TRIpure Reagent 抽提指南◆ 目录号 RP02◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外 使用说明 ◆ EASYspin全血RNA快速提取试剂盒◆ 目录号 1106◆ 使用手册◆ 实验室使用，仅用于体外  PAGE - 7 - - 1 - EASYspin全血RNA快速提取试剂盒 目录号：1106 目录编号包装单位11060120次11060250次 适用范围： 适用于快速提取全血总RNA 试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成保存20次50次10X红细胞裂解液RLB室温10 ml25 ml裂解液RLT室温20 ml50 ml去蛋白液RW1室温15 ml40 ml漂洗液RW室温5 ml 10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O室温10 ml10 ml70%乙醇室温4ml RNase-free H2O 9ml RNase-free H2O第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free 吸附柱RA和收集管室温20套50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。 储存事项： 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 产品介绍： 红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。 产品特点： 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 反复优化的红细胞裂解液配方,裂解效果快速完全。 快速，简捷，单个样品操作一般可在40分钟内完成。 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。 注意事项： 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13，000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵。 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 预防RNase 污染，应注意以下几方面： 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。 RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。） 关于DNA 的微量残留： 一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留（一般电泳EB染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时： 选用跨内含子的